课题设计细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白。DNA与RNA性质上的差异决定了两者的最适分离与纯化的条件是不一样的。临床常见的标本有血液、尿液、唾液、组织及培养细胞等;核酸分离与纯化的方法非常多,如何恰当地收集与准备材料,选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。近年来,有关试剂盒的开发与自动化仪器的使用,能批量制备核酸样品,大大提高了分离与纯化的效率。...
2023-11-04 理论教育
课题设计细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白。DNA与RNA性质上的差异决定了两者的最适分离与纯化的条件是不一样的。临床常见的标本有血液、尿液、唾液、组织及培养细胞等;核酸分离与纯化的方法非常多,如何恰当地收集与准备材料,选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。近年来,有关试剂盒的开发与自动化仪器的使用,能批量制备核酸样品,大大提高了分离与纯化的效率。...
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实验类型 验证性教学时数 3操作视频一、实验目的学习鉴定蛋白质与氨基酸的方法及原理。蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,也能发生此反应。此法可用于蛋白质的定性或定量测定。多数蛋白质分子都含有带苯环的氨基酸,所以有黄色反应。...
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实验类型 验证性教学时数 6一、实验目的掌握测定碘值的原理及操作方法。本实验用硫代硫酸钠滴定过量的溴化钾与碘化钾反应放出的碘,以求出与脂肪加成的碘量。将样品和小管一起放入两个干燥的碘值测定瓶内,切勿使油粘在瓶颈或壁上。...
2023-11-04 理论教育
(一)离心技术离心技术就是利用旋转运动的离心力,以及物质的沉降系数或浮力密度的差别进行分离、浓缩和提纯的一项操作技术。近年来,在生物化学、分子生物学及生物工程等书刊文献中,对于某些大分子化合物,当它们的详细结构和相对分子质量不很清楚时,常常用沉降系数这个概念去描述它们的大小。主要适宜于细菌等微生物、细胞和细胞器等生物材料,及病毒和染色体DNA等的离心分离。...
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实验类型 验证性教学时数 3一、实验目的掌握定磷法测定核酸含量的原理与方法。钼蓝在660nm处有最大光吸收峰,在一定浓度范围内,蓝色的深浅和磷含量呈正比,可用比色法测定。...
2023-11-04 理论教育
实验类型 验证性教学时数 3一、实验目的学习和掌握测定RNA含量的定糖法的原理和操作技术。样品溶液RNA浓度在20~100μg/mL范围内。地衣酚试剂 先配制0.1%三氯化铁浓盐酸溶液(A·R)。使用前再用上述溶液为溶剂配成0.1%的地衣酚溶液。根据测得的吸光度值,从标准曲线上查出相当该吸光度的RNA的浓度,按下式计算样品中RNA的含量。...
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实验类型 验证性教学时数 3一、实验目的学习紫外吸收法测定核酸含量的原理。因而可以核酸的紫外吸收性进行核酸的定量测定。当核酸变性降解时,其紫外吸收强度显著增加,称为增色效应;反之,变性DNA复性后,吸光度降低,称为减色效应。若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质,则测定误差较大,应设法除去。不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定。...
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实验类型 综合性教学时数 6一、实验目的掌握蒽酮比色法测糖的原理和方法。本法多用于测定糖原的含量,也可用于测定葡萄糖的含量。样品液的测定 取4支试管,按下表加样。...
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而对于易分解的生物大分子应选用新鲜材料制备。这一过程是将目的产物与细胞中其他化合物和生物大分子分离,即由固相转入液相,或从细胞内的生理状况转入外界特定的溶液中。选择不同孔径的滤膜截留不同相对分子质量的生物大分子。主要有根据蛋白质带电性质进行分离、根据生物大分子的带电情况分离和根据蛋白质配体的特异性差异分离等。此法适合不耐热的生物大分子浓...
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掌握谷丙转氨酶活力的测定方法。本实验以丙氨酸及α—酮戊二酸作为谷丙转氨酶作用的底物,利用内源性磷酸吡哆醛作辅酶,在一定条件及时间作用后测定所生成的丙酮酸的量来确定其酶活力。经转氨基作用后,α—酮戊二酸减少而丙酮酸增加,因此在波长520m处吸光度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α—酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系,故可测定谷丙转氨酶的活力。在标准曲线上查出丙酮酸的μmol数,计算每100mL血清中转氨酶的活力单位数。...
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实验类型 综合性教学时数 6操作视频一、实验目的学习醋酸纤维薄膜电泳的操作,了解电泳技术的一些原理。醋酸纤维薄膜由二乙酸纤维制成,它具有均一的泡沫状结构,厚度仅120μm,渗透性强,对分子移动无阻力,用它作区带电泳的支持物,具有用量少,分离清晰,无吸附作用,快速简便等优点。用醋酸纤维薄膜做电泳支持物有什么优点?...
2023-11-04 理论教育
实验类型 验证性教学时数 6一、实验目的学习茚三酮溶液测定氨基酸浓度的操作,了解氨基酸定量的一些原理。该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量呈正比,可通过测定570nm处的光密度,测定氨基酸的含量。将样品测定的OD570nm与标准曲线对照,可确定样品中氨基酸含量。...
2023-11-04 理论教育
实验类型 综合性教学时数 6一、实验目的通过大蒜细胞SOD的提取与分离,学习和掌握作方法。蛋白质和酶的提取与分离的基本原理和操作。大蒜蒜瓣和悬浮培养的大蒜细胞中含有较丰富的SOD,通过组织或细胞破碎后,可用pH7.8磷酸缓冲液提取出。并利用各种呈色反应来测定SOD的活力。...
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实验类型 验证性教学时数 3操作视频一、实验目的掌握2,6—二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法。...
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实验类型 综合性教学时数 6操作视频一、实验目的掌握考马斯亮蓝染色法定量测定蛋白质的原理与方法。计算样品中蛋白质含量。...
2023-11-04 理论教育
实验类型 验证性教学时数 3一、实验目的学习用指示剂滴定法测定氨基酸含量。由于这两个基团的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。从分析结果看,双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法相近,单指示剂法稍偏低,主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液pH作为麝香草酚酞的终点。...
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