实验二十九组织块培养技术1.实验目的学会组织块的培养技术，观察组织块的组织学生长行为。组织块法特别适合于组织量少的原代培养，但组织块培养时细胞生长较慢，耗时较长。注意有无污染，已贴壁的组织块边缘有无细胞“长”出。组织块的取材要尽可能快，以免组织块因取材时间过长引起细胞状态不好，将会导致后期培养。...
2023-12-07 百科知识
生物技术制药实验
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限制性内切酶酶切法鉴定重组质粒详细阅读
实验七限制性内切酶酶切法鉴定重组质粒1.实验目的了解酶切法鉴定重组质粒的原理。当EcoRI和ScalI同时酶切一个质粒DNA时，酶切反应必须完全。因此，在设计酶解数量时，不能用量太少，但是酶解数量过多，势必要消耗大量限制性内切酶和DNA，这也是不必要的。...
2023-12-07 百科知识
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基因工程表达物分离纯化实验详细阅读
实验二基因工程表达产物分离纯化1.实验目的熟悉大肠杆菌包涵体表达产物的分离纯化原理及工艺流程。①先复性再纯化以包涵体形式表达的产物经复性后，采用各种色谱柱技术进行进一步的分离纯化。大肠杆菌系统表达产物分离纯化的主要任务是高效获取高比活性的表达产物，去除宿主蛋白质、核酸、内毒素等主要杂质类型。...
2023-12-07 百科知识
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PCR产物的TA克隆在生物技术制药实验中的应用详细阅读
实验六PCR产物的TA克隆1.实验目的掌握通过TA连接克隆PCR产物的原理和方法。因大部分耐热DNA聚合酶反应时都有在PCR产物的3'末端添加一个“A”的特性，所以使用本品可大大提高PCR产物的连接、克隆效率。对克隆后的PCR产物用M13 Primers进行DNA测序。克隆时使用的InsertDNA片段尽量进行切胶回收纯化，PCR产物中的短片段DNA、残存引物等杂质都会影响TA克隆的效率。...
2023-12-07 百科知识
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细菌增殖曲线测定结果详细阅读
实验三十二细菌增殖曲线的测定1.实验目的通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律，绘制生长曲线图2.实验原理大多数细菌的繁殖速率很快，在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每20分钟分裂一次。以培养时间为横坐标，以细菌数目的对数或生长速率为纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。根据细菌生长繁殖的规律，采用哪些措施可使次级代谢产物积累更多？...
2023-12-07 百科知识
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红曲霉色素制备实验-生物技术制药实验七详细阅读
实验七红曲霉摇瓶发酵制备红曲霉色素1.实验目的通过红曲霉红曲色素的发酵制取过程，掌握菌种制备、培养基制备、发酵过程控制、发酵中间参数测定等微生物发酵的基本流程和技术。研究表明，产红曲色素的红曲霉代表菌株有3种，其中以紫红曲霉的红曲色素产量最高。b.红曲色素标准溶液制备准确称量1mg红曲色素标准品，用乙醇定容至10ml，于4℃低温保存。制备含填充剂红曲色素、离心、喷雾干燥成品，计算色素回收率。...
2023-12-07 百科知识
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生物制药实验：Southern印迹杂交详细阅读
实验十五Southern印迹杂交1.实验目的学习和掌握Southern印迹杂交技术，检测重组DNA分子中是否含有目的基因片段。这种技术是由E．M．Southern在1975年首创，因此称Southern印迹杂交。放射自显影将Southern膜置于干净滤纸上，用含同位素的墨水在膜上作标记，以确定方位和检测放射自显影的效率。Southern印迹杂交技术在医学领域有哪些应用价值？Southern印迹杂交实验过程中应注意哪些问题？...
2023-12-07 百科知识
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质粒大规模制备实验结果详细阅读
实验三质粒的大规模制备1.实验目的掌握质粒大规模制备的原理及基本流程。大肠杆菌重组质粒的提取纯化工艺主要建立在常规碱法制备和柱层析分离纯化的基础上。经过上述碱裂解法制备的质粒DNA，还含有大量杂蛋白、内毒素及部分基因组DNA、RNA，因此在大规模制备时，一般采用柱层析方法进行分离纯化。同时也应防止DNase引起DNA的降解。...
2023-12-07 百科知识
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RNA浓度、纯度测定及浓度调整实验-生物技术制药实验详细阅读
实验九RNA浓度、纯度的测定及浓度的调整1.实验目的掌握RNA浓度及纯度的测定方法，并能根据实验需要来调整其浓度。在一定范围内，DNA或RNA的光密度OD260与其含量成正比。对于RNA，根据其在230、260、280nm下紫外吸收值A230、A260、A280，可确定其纯度和浓度。...
2023-12-07 百科知识
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酵母蔗糖酶结晶实验结果详细阅读
实验四十一酵母蔗糖酶的结晶1.实验目的掌握酵母蔗糖酶的结晶方法2.实验原理常用的蛋白质结晶方法有：微池法结晶，蒸汽扩散法，液—液扩散法和透析结晶法等。此步操作为丙酮一硫酸铵协同除杂。将得到的酵母蔗糖酶的晶体显微镜下观察形态并描述，用测微尺测量晶体尺寸并记录。...
2023-12-07 百科知识
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单克隆抗体的制备、纯化和鉴定的实验成果详细阅读
实验十单克隆抗体的制备、纯化及鉴定抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。由于常规抗体的多克隆性质，以及不同批次的抗体制剂质量差异很大，从而不利于其应用。经过克隆选择，可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞，在体内或体外培养，即可无限制地大量制备单克隆抗体。现用的免疫程序中多数是参照制备常规多克隆抗体的方法。...
2023-12-07 百科知识
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胰蛋白酶的亲和色谱实验结果详细阅读
实验四十二胰蛋白酶的亲和色谱1.实验目的掌握采用亲和色谱法分离和纯化胰蛋白酶2.实验原理亲和色谱主要是根据生物分子与其特定的固定化的配基或配体之间具有一定的亲和力而使生物大分子得以分离。②将亲和色谱获得的胰蛋白酶溶液放入透析袋内，在4℃对蒸馏水透析，然后冷冻干燥成干粉。...
2023-12-07 百科知识
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生物技术制药实验：2-DE分析鉴定蛋白质成果详细阅读
实验十二二维双向凝胶电泳分析鉴定蛋白质双向凝胶电泳是目前蛋白质组研究中最有效的分析鉴定技术之一。第二向SDS-PAGE有垂直板电泳和水平超薄胶电泳两种做法，可分离10～100kD分子量的蛋白质。...
2023-12-07 百科知识
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动物细胞培养器皿的清洗与灭菌实验结果详细阅读
实验二十三动物细胞培养器皿的清洗与灭菌1.实验目的学会细胞培养的各种器皿的清洗与消毒。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞培养的好坏直接与细胞培养器皿清洗的彻底与否有很大关系。③干热灭菌主要用于玻璃器皿的灭菌。将用于细胞培养的器皿放入干燥箱内，加热至160℃，保温90～120分钟。用于RNA提取实验的用品则需180℃，保温5～8小时。...
2023-12-07 百科知识
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细胞原代培养成功！生物技术制药实验指南详细阅读
实验二十五细胞的原代培养1.实验目的掌握细胞原代培养的基本方法和操作过程以及无菌操作方法。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。一个鸡胚约100ml细胞悬液。...
2023-12-07 百科知识
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细胞生长曲线测定方法-生物技术制药实验详细阅读
实验二十八细胞生长曲线的测定1.实验目的掌握测定细胞生长曲线的方法。了解细胞生长发育的特性。除使用计数法测定细胞的生长曲线外，还可用MTT比色法间接测量。生长曲线常用于测定药物等外来因素对细胞生长的影响。在需要确知细胞数量的场合不宜用MTT法。...
2023-12-07 理论教育