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表观遗传与蛋白对植物发育的调控

【摘要】:表观遗传是通过染色质结构影响基因表达并可遗传,但不涉及DNA序列的现象。对组蛋白进行甲基化修饰的就有以果蝇为代表的Polycomb group和trithorax group复合物。果蝇中的PcG复合物有POLYCOMB REPRESSIVE COMPLEX 1、2,果蝇trxG复合物至少有三类,PcG对HOX的表达起抑制作用,而TrxG作用相反。PcG和trxG都含有SET区域,为甲基化酶活性区域。PRC1复合物在有些物种不存在,有些物种中其结构成分发生变化。EMF1、LHP1和RAWUL可能是植物中PRC1的组成成分。

表观遗传是通过染色质结构影响基因表达并可遗传,但不涉及DNA序列的现象。表观遗传包括了与染色质有关的各种修饰,包括DNA甲基化、组蛋白变异、组蛋白翻译后修饰、各种染色质结合蛋白。基因组中对特定序列中胞嘧啶甲基化的DNA甲基化类型和染色质修饰类型可以随分裂传递到子细胞,这种遗传与染色质包装和组蛋白传递复合物有关,涉及一系列复杂过程和蛋白(Alvarez-Venegas,2010)。

组蛋白翻译后修饰有乙酰基化、甲基化、泛素化、磷酸化、SUMO化。拟南芥四个核心组蛋白H2A、H2B、H3、H4上的赖氨酸乙酰基化有:H4的K20、H2A的K144、H2B的K6、K11、K27、K32,磷酸化的有:H2A的S129、S141、S145、H2B的S15,泛素化的有:H2B的K143。组蛋白赖氨酸甲基化常见的有H3K4、H3K9、H3K27、H3K36、H3K79、H4K20、H1K26,每个赖氨酸上甲基化的次数可以是多级,每一级可出现不同的表型。组蛋白上不同类型的修饰之间在特定结构和情况下可能有一定联系。如酵母H2B的单泛素化对H3K4和H3K79的三甲基化是必需的。春化过程中FLC位点H3K9和H3K27二甲基化增加,同时H3K4三甲基化和乙酰基化减少,使得FLC表达被抑制(Alvarez-Venegas,2010)。物种不同,甲基化类型也会有不同。如大豆H3上K4、K27、K36的单、双、三甲基化和K14、K18、K23的乙酰基化在叶中检测到,K27主要是单甲基化,K36主要是三甲基化,且K27和K36的甲基化在大豆中互相排斥。H3K79在拟南芥未见报道,在大豆中检测到单和双甲基化(Alvarez-Venegas,2010)。

对染色质组蛋白进行修饰的是各种复合物。对组蛋白进行甲基化修饰的就有以果蝇为代表的Polycomb group(PcG)和trithorax group(trxG)复合物。果蝇中的PcG复合物有POLYCOMB REPRESSIVE COMPLEX 1、2(PRC1、2),果蝇trxG复合物至少有三类,PcG对HOX的表达起抑制作用,而TrxG作用相反。PcG和trxG都含有SET(Su(var)3-9、E(z)、Trithorax related)区域,为甲基化酶活性区域。在植物中也发现了相似基因或复合物。拟南芥有43个含有SET区域的蛋白,命名为SDG1-43(Alvarez-Venegas,2010)。

拟南芥有12个PRC2复合物亚单位,3个E(z)类似蛋白:CLF、MEDEA(MEA或SDG5)、SWINGER(SWN或SDG10);三个Supressor of zeaste(Su(z)12)类似物:EMF2、FERTILIZATION INDEPENDENT SEEDS2(FIS2)、VERNALIZATION2(VRN2);the single Extra sex combs(Esc)类似蛋白:FERTILIZATION INDEPENDENT ENDOSPERM(FIE);5个p55类似蛋白:MULTICOPY SUPRESSOR OF IRA(MSI 1-5)。拟南芥中至少有3个PRC2类似复合物:控制种子发育的FIS PRC2或MEA-FIE复合物,控制春化反应的VRN复合物,抑制早开花和花发育的EMF复合物(Alvarez-Venegas,2010)。FIE和MSI1可能是三类PRC2复合物中的共有成分,而三类不同的E(z)3(CLF、SWN、MEA)和Su(z)12(EMF2、VRN2、FIS2)则分布在不同的PRC2中,特异修饰不同的目标基因,具有不同的功能(Alvarez-Venegas,2010)。FIS、MSI1、MEA、FIS2复合物在种子发育起始中起重要作用,并在配子体母方效应中起作用。EMF复合物(CLF/SWN、EMF2、FIE、MSI1)在配子发育中沉默一些基因,CLF、SWN在配子发育晚期取代MEA的作用。春化作用中沉默FLC(FLOWER LOCUS C)的VRN类PRC2复合物含有VRN2、SWN、FIE、MSI1、三个PHD指蛋白VRN5、VIN3(VERNALIZATION INSENSITIVE3)、VEL1,这种VRN复合物增加FLC位点染色质中H3K27me3水平,导致春化中稳定的FLC沉默。春化开始时VRN5和H3K27me3标记只分布于FLC第一个内含子的开始和起始部位,在恢复到温暖条件后扩展到整个FLC位点。因此FLC整个位点的H3K27me3标记和春化沉默涉及不同的PcG复合物成分(Alvarez-Venegas,2010)。在拟南芥中,VIN3和FLC类似的基因各有一个家族,都通过染色质修饰复合物进行修饰。在春化过程中VIN3和FLC家族不同基因对应性地行使细微变异的调控功能(Kim and Sung,2013)。EMF(EMBRYONIC FLOWERING)复合物在抑制早开花和抑制开花因子中起重要作用,其中CLF、EMF2、FIE复合物抑制FLC和其相关基因MAF4、MAF5(MADS AFFECTING FLOWERING4、5)。CLF、EMF2、FIE也通过将H3K27me3放置于FT位点而直接将其沉默(Alvarez-Venegas,2010)。

PRC1复合物在有些物种不存在,有些物种中其结构成分发生变化。果蝇PRC1复合物中的PC蛋白通过结合到H3K27me3上而保持稳定、长期的沉默,拟南芥中染色质蛋白LIKE HETEROCHROMATIN PROTEIN1(LHP1,又名TERMINAL FLOWER2,TFL2)具有相同的功能。LHP1作用于常染色质基因的沉默(Alvarez-Venegas,2010)。EMF1、LHP1和RAWUL可能是植物中PRC1的组成成分(Scofield et al.,2008)。(www.chuimin.cn)

拟南芥TRX基因有5个拷贝,分成两组:ATX1、ATX2(ARABIDOPSIS HOMOLOG of TRITHORAX1(SDG27)、TRITHORAX(SDG30))和ATX3(SDG14)、ATX4(SDG16)、ATX5(SDG29)。ATX1具有多重甲基化酶活性,将H3K4me3标记在AG染色质处,对开花关键基因AP1、AP2、AG保持正常的表达水平是必需的,PI和AP3的表达对ATX1的活性也有一定需要。ATX1在开花前直接结合在FLC核小体上标记H3K4me3,同时H3K27me2减少,伴随着开花转变,ATX1从该位点释放。ATX1与拟南芥中类似人类H3K4核心甲基化酶WDR5的WRD5a相互作用,共同在FLC位点富含FRI的复合物中将H3K4甲基化,激活FLC,并在核小体的H3K4me3类型建立中起作用(Alvarez-Venegas,2010)。ATX2具有将H3K4二甲基化的活性,ATX3主要在雌配子体中的卵细胞和中心细胞表达。除了ATX家族外,拟南芥还有7个Trithorax-related(ATXR)基因。ATXR5(SDG15)位于质体和核仁,ATXR6(SDG34)只位于细胞核,它们可将H3K27单甲基化,参与染色质浓缩和基因沉默。ATXR7(SDG25)也具有H3K4甲基化酶活性,可促进FLC表达。因此,ATX1和ATXR7对FLC的表达具有正的调控作用(Alvarez-Venegas,2010)。

拟南芥与果蝇trxG类基因Ash1(absent,small,orhomeotic discs 1)相似的有四组:ASHH1/SDG26、ASHH2/SDG8、ASHH3/SDG7、ASHH4/SDG24,另外还有三个相关基因:ASHR1/SDG37、ASHR2/SDG39、ASHR3/SDG4。ASHH2/SDG8与染色质H3K6甲基化有关,在拟南芥最早以efs(early fl owering in short days)被发现,参与FLC启动子和第一个内含子位点的H3K36的甲基化,也与FLC位点的H3K4三甲基化有关。此外,SDG8还参与调控茎分枝和类胡萝卜素合成有关基因的表达调控。ASHH1/SDG26与基因表达抑制有关,其突变导致晚开花。ASHR3/SDG4与雄性育性有关,突变后导致雄性不育(Alvarez-Venegas,2010)。

在植物发育过程中,PcG和TrxG对基因表达的控制具有拮抗作用。如对AG位点染色质的甲基化修饰,PRC2的组成成员、PcG基因CLF在叶中介导H3K27的三甲基化,直接抑制AG的转录,而TrxG成员ATX1通过H3K4的三甲基化,在花中保持AG的高转录水平,另一个TrxG成员ULT1(ULTRAPETALA-1)在核中与ATX1相互作用,在花的发育过程中参与连续的H3K4甲基化或为转录起始和延长阅读染色质标记(Alvarez-Venegas,2010)。春化过程中FLC位点的H3K9和H3K27的二甲基化的增加,H3K4三甲基化和组蛋白乙酰基化的减少导致FLC的转录沉默,以VRN2参与的PRC2复合物(包括SWN、CLF、FIE)起抑制的主导作用。而TrxG成员ATX1以及含有ELF7的复合物PAF1c通过H3K4me3的增加上调FLC的表达。常见的组蛋白激活修饰为乙酰基化和H3K4和H3K36的甲基化,沉默修饰为去乙酰基化和H3K9和H3K27的甲基化。还有复杂的组蛋白修饰组合,如在胚性干细胞中在沉默的基因位点同时存在H3K4me3和H3K27me3,建立起双价染色质修饰态。AG位点染色质在沉默态同样也存在H3K4me3和H3K27me3双价态。拟南芥基因位点在不同的组织、不同发育时期可以有不同H3K9、H3K4、H3K27的甲基化标记组合。这个领域目前未知空间很大(Alvarez-Venegas,2010)。