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百合组培研究助力成功

【摘要】:利用植物组织培养技术,快速繁殖优质、无病毒的百合种苗,将极大地促进百合花的规模化、商品化生产。表10-4-3不同培养基对小鳞茎生根的影响结果表明,IBA、NAA对百合生根均有良好的效果。本试验对影响百合成苗和增殖的2种激素进行了初步研究,从中选出了利于成苗和增殖的最优组合。在培养过程中糖的浓度对试管苗结鳞茎也有影响,关于糖浓度及其调控和增加其他一些激素使百合在试管内快速结鳞茎和增大鳞茎等技术,有待于进一步研究。

百合为百合科百合属球根花卉,是世界著名的切花和盆花,在国内外花卉市场越来越走俏,有些百合鳞片还是我国特产的优质保健品。百合的花色、花形各异,常被人们视为纯洁、光明、自由和幸福的象征。我国虽是百合的主要分布区,但百合的生产规模并不大,主要是种球繁殖的问题。

生产中百合主要采用分球、分株芽的繁殖方法。其繁殖系数低、繁殖周期长,而且经过多代分植以后,种性退化,难以满足百合切花和盆花的生产需要。利用植物组织培养技术,快速繁殖优质、无病毒的百合种苗,将极大地促进百合花的规模化、商品化生产。

图10-4-1 百合试管苗

1.材料的选取及消毒

选择健壮、无病斑、色泽光亮的香水百合鳞片,先在浓洗衣粉水中浸泡30 min,用软毛刷轻轻刷洗干净,后用清水冲洗;在超净工作台上,放入75%酒精5~30 s,无菌水冲洗4~5次;再转入0.1%升汞溶液表面灭菌5~15 min,无菌水冲洗4~6次,接种于启动培养基上。

2.初代培养

培养基以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、NAA,设置NAA 0.5、1.0、2.0 mg/L 3个浓度梯度,6-BA 0.1、0.2、0.5 mg/L 3个浓度梯度,自由组合,共有9种配方。各配方的效果见表10-4-1。

表10-4-1 不同培养基对小鳞茎诱导的影响

接种15 d后,外植体表面开始凸起,25 d后产生小鳞茎,每块外植体可产生5~8个小鳞茎。经过筛选,基本培养基以MS为最适培养基,秋、冬季的鳞片最易分化出小鳞茎,鳞片外植体的最适分化培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。在此培养基上,鳞片产生小鳞茎的诱导率最高且苗生长良好。

3.继代培养

将初代培养产生的小鳞茎切割后分别接种于不同的培养基上。培养基中6-BA 0.5 mg/L,NAA设置5个浓度梯度:0.1、0.5、1.0、2.0、3.0 mg/L,即配方5个。接种后半个月鳞茎开始增殖,1个月后可产生大量小鳞茎,通过筛选,以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L效果较好,增殖快,小鳞茎生长健壮。效果见表10-4-2。

表10-4-2 不同培养基对小鳞茎增殖的影响(www.chuimin.cn)

4.生根培养

将3~5 cm的小苗从基部切下,接种在生根培养基上,生根培养基设置6种配方,基本培养基选用1/2 MS培养基。配方及生根情况见表10-4-3。

表10-4-3 不同培养基对小鳞茎生根的影响

结果表明,IBA、NAA对百合生根均有良好的效果。

5.移栽

对于苗高3~4 cm的已生根且带有鳞茎的小苗,可打开瓶口炼苗3~5d,然后栽入基质中,基质设置4种配方,各配方移栽成活率见表10-4-4。保持温度15℃~25℃、湿度70%以上、50%自然光照,可得到较高成活率。所用基质首先要灭菌。如果用未灭菌的基质,小苗茎部容易受细菌和霉菌的侵染而腐烂,影响成活率;用高温灭菌的基质,小苗不容易得病,长势健壮,成活率较高。

表10-4-4 试管苗移栽成活率

6.结果与讨论

综合以上试验结果得出:6-BA主要有提高增殖系数的作用,但减小鳞茎直径,苗纤细,同时抑制植株长高和生根。NAA有促进成苗、植株长高和生根的作用,但NAA过多会使气生根增多,不利于小苗生长。所以适当地调整6-BA和NAA的浓度比,才能得到理想的结果。本试验对影响百合成苗和增殖的2种激素进行了初步研究,从中选出了利于成苗和增殖的最优组合。在培养过程中糖的浓度对试管苗结鳞茎也有影响,关于糖浓度及其调控和增加其他一些激素使百合在试管内快速结鳞茎和增大鳞茎等技术,有待于进一步研究。