影响细胞悬浮培养的主要因素-植物组织培养快繁技术成果

2023-11-20 理论教育版权反馈

【摘要】：如加入2，4-D，往往阻止多种植物细胞培养时有用物质的产生，但能显著提高人参皂甙的产量。这与液体培养基中存在的溶解氧的浓度有关，当培养基中的氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体，而氧浓度高于临界水平时，利于根的形成。

1.培养基

培养基成分与细胞培养的生物量和有用物质含量的提高有密切关系，要互相协调。最主要是根据不同种类的培养细胞选择适当的碳源、氮源。培养基pH为5～6较为适宜。

细胞培养中生长调节物质的数量和种类对次生物质的合成起着重要作用。生长素和细胞分裂素具有促进细胞分裂的作用，而且不同类别的生长素对次生代谢产物合成有着不同的影响。如加入2，4-D，往往阻止多种植物细胞培养时有用物质的产生，但能显著提高人参皂甙的产量。

2.光照条件

光照时间、光质和光照强度对培养细胞的生长和有用物质的生产均有较大影响。如芸香愈伤组织在光照下培养，其芳香化合物的含量比暗培养下增加1.5～3.6倍。但光也能抑制某些化合物产生，如蓝光和白光能使紫草素合成受阻，萜烯类合成也能被蓝光和强白光抑制。

3.温度

温度对细胞的生长和有用物质的合成与积累均有一定的影响，细胞培养时温度一般为25℃左右。此温度下，培养物能与氧气充分接触，有利于细胞的代谢和次生物质的合成。

4.氧浓度(www.chuimin.cn)

胡萝卜细胞悬浮培养中存在两种再生小植株的方式，即先形成根，再长出小植株，或经由胚状体成苗。这与液体培养基中存在的溶解氧的浓度有关，当培养基中的氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体，而氧浓度高于临界水平时，利于根的形成。

【思考题】

1.简要说明分离单细胞的方法。

2.单细胞培养常用的方法有哪几种？指出每一种方法的要点。

3.什么是植板率？

4.什么是细胞悬浮培养？简述成批培养和连续培养的特点。

5.影响细胞悬浮培养的因素主要有哪些？