植物组培快繁的关键是植物在组织培养中再分化器官发生类型,也是组织培养中间繁殖体增殖的类型。植物组织培养中间繁殖体的类型是多种多样的,再生方式也不统一,其类型关系到繁殖速度和繁殖数量。美国红栌、叶子花、樱桃砧木等木本植物通过这种器官发生类型进行组培快繁,速度快。杨树、半夏、海棠、菊花等植物的快繁都可以通过这种器官发生类型增殖。图5-2-4原球茎发生型图5-2-5植物组织培养再分化植株的类型与繁殖途径......
2023-11-20
指示植物法是利用病毒在一些植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法。这些对病毒反应敏感、症状特征显著的植物称为指示植物,又称鉴别寄主。指示植物法只能鉴别靠汁液传染的病毒。
图6-3-1 植物汁液涂抹法病毒鉴定示意图
指示植物法最早是美国病毒学家Holmes于1929年发现的。他将感染TMV的普通烟叶的粗汁液和少许金刚砂相混,然后在心叶烟叶片上摩擦,2~3 d后叶片上出现了局部坏死斑。在一定范围内,枯斑与侵染性病毒的浓度成正比。这种方法条件简单,操作方便,故一直沿用至今,仍为一种经济而有效的鉴定方法。该法不能测出病毒总的核蛋白浓度,只能测出病毒的相对感染力。
病毒的寄主范围不同,所以应根据不同的病毒选择适合的指示植物。此外,所选指示植物应一年四季都易栽培,且在较长的时期内保持对病毒的敏感性,容易接种,并在较广的范围内具有同样的反应。指示植物一般有两种类型:一种是接种后产生系统性症状,病毒可扩展到植物非接种部位,通常没有局部病斑明显;另一种是只产生局部病斑,常由坏死、褪绿或环状病斑构成。(www.chuimin.cn)
图6-3-2 草莓指示植物小叶嫁接病毒鉴定示意图
接种时从被鉴定植物上取1~3 g幼叶,在研钵中加10 mL水,加少量或等量0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH 7),研成匀浆。再在汁液中加入少量500~600目金刚砂作为指示植物叶片的摩擦剂,使叶面产生小的伤口,而不破坏表面细胞。用棉球蘸取汁液在叶面上轻轻涂抹2~3次进行接种,后用清水冲洗叶面。接种工作应在防蚜虫温室中进行,温度保持在15℃~25℃。接种后2~6 d,即可观察是否有典型症状出现。木本多年生果树及草莓等无性繁殖的草本植物,采用汁液接种法比较困难,因而通常采用嫁接接种的方法,即以指示植物做砧木,以被鉴定植物做接穗,常用劈接法。
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2023-11-20
目前,植物组织培养已成为生物工程的一项重要技术,在基础理论研究和生产实践中发挥的作用与日俱增,可望为造福人类做出更大贡献。目前,这项技术已相当成熟,国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。......
2023-11-20
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2023-11-20
从此植物组织培养进入快速发展时期。椰乳成分复杂,含有多种不同的有机物,后来的研究发现,在组织培养中起主要作用的是腺嘌呤类激素或类似物。研究发现,生长素和细胞分裂素相互配合能调节细胞的分裂与分化、控制器官的分化,植物组织培养工作迅速取得突破。从此之后,一批又一批植物的组织或器官通过培养的方法获得了再生植株。......
2023-11-20
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2023-11-20
接种后的外植体应放在培养室培养。培养室的条件要根据植物对环境条件的不同需求进行调控,其中最主要的条件是光照、温度、湿度、氧气和培养基的pH值。光质对愈伤组织的诱导、培养组织的增殖以及器官的分化有明显的影响。通常低于15℃时,培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞,但高于35℃对生长也不利。氧气是植物组织培养必需的,在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中,以免缺氧。......
2023-11-20
(二)半连续培养法半连续培养法是在反应器中投料和接种培养一段时间后,将部分旧培养液和新鲜培养液进行交换的培养方法。此法可不断补充培养液中的营养成分,减少接种次数,培养细胞所处的环境与分批培养法一样,随时间而变化。工业生产中为简化操作过程、确保细胞增殖量,常采用半连续培养法。在连续培养期间,新鲜培养液的注入速度等于旧培养液的排出速度,细胞也随悬浮液一起排出,不再收集流出的细胞。......
2023-11-20
(一)胚珠培养胚珠培养是将授粉的子房在无菌的条件下解剖后,取出胚珠置于培养基上培养形成幼苗的技术。根据胚珠培养的不同目的,可将胚珠培养分为受精胚珠培养和未受精胚珠培养两种形式。因此,在进行单个胚珠培养不能成功时,常可考虑用带有胎座或子房的胚珠进行培养。如诱导未受精子房胚囊核单倍体组织发生,就需要在培养基中加入一定量的外源激素。......
2023-11-20
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