植物组培快繁的关键是植物在组织培养中再分化器官发生类型,也是组织培养中间繁殖体增殖的类型。植物组织培养中间繁殖体的类型是多种多样的,再生方式也不统一,其类型关系到繁殖速度和繁殖数量。美国红栌、叶子花、樱桃砧木等木本植物通过这种器官发生类型进行组培快繁,速度快。杨树、半夏、海棠、菊花等植物的快繁都可以通过这种器官发生类型增殖。图5-2-4原球茎发生型图5-2-5植物组织培养再分化植株的类型与繁殖途径......
2023-11-20
接种后的外植体应放在培养室培养。培养室的条件要根据植物对环境条件的不同需求进行调控,其中最主要的条件是光照、温度、湿度、氧气和培养基的pH值。
1.光照
植物组织培养是在含糖的培养基上进行的,所以光照的主要作用在形态建成的诱导方面。光对组织培养的影响主要表现在光照时间、光照强度和光质三个方面。
(1)光照时间:大多数植物选择通过一定的光暗周期来进行组织培养。每天14~16 h光照,8~10 h黑暗,即可满足大多数植物生长发育的需要。研究表明,对短日照敏感的品种的器官组织,在短日照下易分化,而在长日照下产生愈伤组织,有时需要暗培养,尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光照下生长更好,如红花、乌饭树的愈伤组织。
(2)光照强度:光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响,尤其是对外植体细胞的最初分裂有明显的影响。一般来说,光照强度较强,幼苗生长得粗壮,而光照强度较弱,幼苗容易徒长。对绝大多数植物来说,1000~5000 lx的光照强度即能满足一般组织培养的需要。
(3)光质:光质通常指不同波长的光波。光质对愈伤组织的诱导、培养组织的增殖以及器官的分化有明显的影响。一般红光可引起细胞干物质的重量增加并利于根的形成;蓝光可引起细胞中的质体转化为叶绿体,对促进腋芽、不定芽生长有明显的作用。如百合珠芽在红光下培养,8周后分化出愈伤组织,但在蓝光下培养,十几周后才出现愈伤组织;唐菖蒲子球块接种15 d后,在蓝光下培养首先出现芽,形成的幼苗生长旺盛,而白光下幼苗纤细。倪德祥等对香石竹的研究表明,白光下生长量最大,红、黄、绿、蓝光对生长有抑制作用,单色光对叶绿素合成有抑制作用,叶绿素的合成需要在复合光条件下完成。
2.温度
在植物组织培养中,不同植物繁殖的最适温度不同,一般在23℃~28℃之间。通常低于15℃时,培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞,但高于35℃对生长也不利。植物组织培养过程所需温度与其原产地有关,一般原产于热带或亚热带的植物,培养时需要较高的温度,即(28±2)℃;生长在高海拔和较低温度环境的植物,则培养的环境温度可适当低些,因为在较高温度条件下组培苗生长缓慢。(www.chuimin.cn)
3.湿度
植物组织培养中的湿度主要有两个方面:一是培养容器内的湿度条件,二是培养室的湿度条件。培养容器内的湿度主要受培养基影响,相对湿度可达100%,而培养室的湿度随季节有很大变动,它可以影响培养基的水分蒸发,一般要求70%~80%的相对湿度。培养室的湿度过高过低都不利于培养物的生长,过低会造成培养基失水,从而改变各种成分的浓度,使渗透压升高,影响培养物的生长和分化;过高又会造成杂菌滋生,导致污染。
4.通气状况
培养容器内的气体成分会影响培养物的生长和分化。氧气是植物组织培养必需的,在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中,以免缺氧。在静止的液体培养基中宜架上滤纸桥,由滤纸的浸润提供水分和营养。另外,培养基经高压灭菌,瓶中可能有乙烯产生,而且在培养过程中培养物本身也会释放乙烯和高浓度的二氧化碳。高浓度的乙烯对正常的形态建成是不利的,会阻碍培养物的生长,甚至会对培养物产生毒害作用。
5.培养基的pH值
外植体的培养增殖都要求一定的pH值。通常一般培养基的pH值在5.6~6.0之间。如果pH值不适则直接影响外植体对营养物质的吸收,进而影响外植体的脱分化、增殖和器官形成。不过pH值对不同植物的影响会有差异,有的宜偏酸,有的宜偏碱,在实际工作中应依不同植物而调整。
有关植物组织培养快繁技术的文章
植物组培快繁的关键是植物在组织培养中再分化器官发生类型,也是组织培养中间繁殖体增殖的类型。植物组织培养中间繁殖体的类型是多种多样的,再生方式也不统一,其类型关系到繁殖速度和繁殖数量。美国红栌、叶子花、樱桃砧木等木本植物通过这种器官发生类型进行组培快繁,速度快。杨树、半夏、海棠、菊花等植物的快繁都可以通过这种器官发生类型增殖。图5-2-4原球茎发生型图5-2-5植物组织培养再分化植株的类型与繁殖途径......
2023-11-20
植物组培快繁过程一般可分为四个阶段,即初代培养、继代培养、生根培养和组培苗的驯化移栽。一般木本植物、较大的草本植物以茎段比较适宜,因为茎段取材容易,可在一定的培养基上通过萌发出侧芽或产生不定芽成为进一步繁殖的材料。接种后培养基上如出现微生物污染会导致培养失败。将由外植体或愈伤组织产生的胚状体进一步切割,转接于增殖培养基中,扩大胚状体数量,常用液体振荡培养方式。......
2023-11-20
目前,植物组织培养已成为生物工程的一项重要技术,在基础理论研究和生产实践中发挥的作用与日俱增,可望为造福人类做出更大贡献。目前,这项技术已相当成熟,国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。......
2023-11-20
从此植物组织培养进入快速发展时期。椰乳成分复杂,含有多种不同的有机物,后来的研究发现,在组织培养中起主要作用的是腺嘌呤类激素或类似物。研究发现,生长素和细胞分裂素相互配合能调节细胞的分裂与分化、控制器官的分化,植物组织培养工作迅速取得突破。从此之后,一批又一批植物的组织或器官通过培养的方法获得了再生植株。......
2023-11-20
花卉组培程序与其他植物一样,包括以下程序。生长素和细胞分裂素的种类和浓度因花卉种类、品种以及诱导、增殖、生根等不同阶段而有所不同,经过愈伤组织和不定芽的诱导、分化及丛芽增殖培养,形成许多芽丛,最后将达到生根质量标准的小苗进行生根培养,形成具有根、茎、叶的完整小植株。......
2023-11-20
指示植物法是利用病毒在一些植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的方法。这些对病毒反应敏感、症状特征显著的植物称为指示植物,又称鉴别寄主。图6-3-1植物汁液涂抹法病毒鉴定示意图指示植物法最早是美国病毒学家Holmes于1929年发现的。病毒的寄主范围不同,所以应根据不同的病毒选择适合的指示植物。此外,所选指示植物应一年四季都易栽培,且在较长的时期内保持对病毒的敏感性,容易接种,并在较广的范围内具有同样的反应。......
2023-11-20
在细胞培养中,既可以从植物器官、组织中分离单细胞,也可以从愈伤组织中分离单细胞。用孔径200 μm的细胞筛过滤,除去大块细胞团,再以4000 r/min速度离心,除去比单细胞小的残渣碎片,获得纯净的单细胞悬浮液。......
2023-11-20
(二)半连续培养法半连续培养法是在反应器中投料和接种培养一段时间后,将部分旧培养液和新鲜培养液进行交换的培养方法。此法可不断补充培养液中的营养成分,减少接种次数,培养细胞所处的环境与分批培养法一样,随时间而变化。工业生产中为简化操作过程、确保细胞增殖量,常采用半连续培养法。在连续培养期间,新鲜培养液的注入速度等于旧培养液的排出速度,细胞也随悬浮液一起排出,不再收集流出的细胞。......
2023-11-20
相关推荐