因为植物组织培养是在无菌条件下进行的,所以无菌的外植体是取得组织培养成功的基本保证。因此,外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要环节。......
2023-11-20
植物组织培养的材料几乎包括了植物体的各个部位,如茎尖、茎段、花瓣、根、叶、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。
木本植物、较大的草本植物一般选取茎段比较适宜,其能在培养基中萌发侧芽,进一步发育出繁殖材料,如月季、黄杨、变叶木等。一些草本植物本身矮小,或缺乏显著的茎,一般可选用叶片、叶柄、花葶或花瓣等做外植体,如非洲菊、紫罗兰、康乃馨、秋海棠、菊花等。北海道黄杨选用带有饱满而未萌发侧芽的当年生嫩茎做外植体,取得了良好效果。
图4-1-1 月季外植体培养
1.茎尖
茎尖不仅生长速度快,繁殖率高,不容易发生变异,而且茎尖培养是获得脱毒苗木的有效途径,因此茎尖是植物组织培养中最常用的外植体。
2.节间部
大部分果树和花卉等植物,新梢的节间部是组织培养较好的材料。新梢节间部不仅消毒容易,而且脱分化和再分化能力较强,因此是常用的组织培养材料。(www.chuimin.cn)
3.叶片和叶柄
叶片和叶柄取材容易,新出的叶片杂菌较少,实验操作方便,是植物组织培养中常用的材料,尤其是近年在植物的遗传转化中,以叶片为试验材料的报道很多。
4.鳞片
水仙、百合、葱、蒜、风信子等鳞茎类植物常以鳞片为材料。
5.其他
种子、根、块茎、块根、花粉等也可以作为植物组织培养的材料。
但是,不同种类的植物以及同种植物不同的器官对诱导条件的反应是不一致的。如百合科植物风信子、虎眼万年青等比较容易形成再生小植株,而郁金香就比较困难。百合鳞茎的鳞片外层比内层再生能力强,下段比中、上段再生能力强。选取材料时要对所培养植物各部位的诱导及分化能力进行比较,从中筛选出合适的、最易表达全能性的部位作为外植体。
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2023-11-20
一般来说,植物材料中单宁类和多种羟酚类化合物的含量高,易引起外植体材料的严重褐变。培养基的pH值较低时常有利于减轻外植体的褐变程度。在许多热带树木的组织培养中均曾观察到活性炭防止外植体褐变的明显效果。......
2023-11-20
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2023-11-20
实训室应有消火栓、报警装置等安全设施。一个完整的植物组织培养实训室通常包括洗涤室、准备室、无菌操作室、培养室、温室。(三)无菌操作室(接种室)无菌操作室主要完成植物材料的消毒和接种、培养物的继代及细胞融合等工作,大小视生产规模和超净工作台的数量而定。(四)培养室图2-1-2超净工作台图2-1-3培养室培养室是将接种到培养瓶等器皿中的各种植物材料进行培养的场所。......
2023-11-20
②放入灭菌物品。溶液等物品在灭菌结束时,为了防止灭菌器自动泄压使灭菌室压力突然降低,引起瓶内液体剧烈沸腾,可在计时器结束前手动关闭电源开关,使温度和压力自然降低。......
2023-11-20
接种后的外植体应放在培养室培养。培养室的条件要根据植物对环境条件的不同需求进行调控,其中最主要的条件是光照、温度、湿度、氧气和培养基的pH值。光质对愈伤组织的诱导、培养组织的增殖以及器官的分化有明显的影响。通常低于15℃时,培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞,但高于35℃对生长也不利。氧气是植物组织培养必需的,在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中,以免缺氧。......
2023-11-20
3.能正确对外植体进行消毒。其根、皮、果可入药,治疗烫伤极佳。因此,建立北海道黄杨的组织培养快繁技术体系,对该树种在本地区的推广具有重要作用。1个月后,进行第二次移栽,实行正常管理。......
2023-11-20
其目的是建立无菌培养物,诱导腋芽或顶芽萌发,或产生不定芽、愈伤组织、原球茎。该阶段通常是植物组织培养中比较困难的阶段,也称为启动培养、诱导培养。其目的是使培养物大量繁殖,也称为增殖培养。......
2023-11-20
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