植物组培快繁过程一般可分为四个阶段，即初代培养、继代培养、生根培养和组培苗的驯化移栽。一般木本植物、较大的草本植物以茎段比较适宜，因为茎段取材容易，可在一定的培养基上通过萌发出侧芽或产生不定芽成为进一步繁殖的材料。接种后培养基上如出现微生物污染会导致培养失败。将由外植体或愈伤组织产生的胚状体进一步切割，转接于增殖培养基中，扩大胚状体数量，常用液体振荡培养方式。......
2023-11-20
北海道黄杨组织培养快繁技术：外植体选择及步骤
【摘要】：外植体是指植物组织培养中第一次接种用的各种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质体等。为保证植物组织培养获得成功，选择合适的外植体是非常重要的。北海道黄杨是优良绿化树种，特别适合在北方冬季寒冷、干旱的地区栽植，因此，建立北海道黄杨的组织培养快繁技术体系，对该树种在本地区的推广具有重要作用。北海道黄杨选择健壮的植株，经室内盆栽培养一段时间后，形成当年生嫩茎，此时进行组织培养最适宜。
外植体是指植物组织培养中第一次接种用的各种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质体等。
从理论上讲，植物细胞具有全能性，能够再生新植株，任何器官、任何组织、单个细胞和原生质体都可以作为外植体。但实际上，不同品种、不同器官之间的分化能力有巨大差异，培养的难易程度不同。为保证植物组织培养获得成功，选择合适的外植体是非常重要的。
1.选择优良的种质及母株
无论是离体培养繁殖种苗，还是进行生物技术研究，培养材料的选择都要从主要的植物入手，选取性状优良的种质、特殊的基因型和生长健壮的无病虫害植株。尤其是进行离体快繁，只有选取优良的种质和基因型，离体快繁出来的种苗才能转化成商品；生长健壮、无病虫害的植株及器官或组织代谢旺盛，再生能力强，培养后容易成功。
北海道黄杨是优良绿化树种，特别适合在北方冬季寒冷、干旱的地区栽植，因此，建立北海道黄杨的组织培养快繁技术体系，对该树种在本地区的推广具有重要作用。(www.chuimin.cn)
2.选择适当的时期
组织培养选择材料时，要注意植物的生长季节和生长发育阶段。对大多数植物而言，应在其开始生长或生长旺季采样，此时材料微生物侵染比较少，同时内源激素含量高，容易分化，不仅成活率高，而且生长速度快，增殖率高。花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材，这时比较容易形成愈伤组织。百合在春夏季采集的鳞茎、叶片，在不加生长素的培养基中可自由地生长、分化，其他季节则不能。叶子花的腋芽培养，如果在11月至翌年2月间采集，则腋芽萌发非常迟缓；在3～8月间采集，则萌发数目多，萌发速度快。对多数一年生的花卉植物来说，虽然无明显的生长期和休眠期，但仍以幼嫩的组织和器官为好。北海道黄杨选择健壮的植株，经室内盆栽培养一段时间后，形成当年生嫩茎，此时进行组织培养最适宜。
3.选取适宜的大小
培养材料的大小根据植物种类、器官和培养目的来确定。通常情况下，快速繁殖时叶片、花瓣等面积为20～25 mm2，其他培养材料的长度为0.5～1 cm。如果是胚胎培养或脱毒培养的材料，则应更小。茎尖分生组织带1～2个叶原基，长度为0.2～0.3 mm。材料太大，不易彻底消毒，污染率高；材料太小，多形成愈伤组织，甚至难以成活。
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