图3-1-1培养基成分(一)水分水分是离体植物生长所必需的成分。在培养基制备过程中所用的水必须是蒸馏水或纯水,以免水中杂质以及所含矿质元素离子对培养结果产生影响。在培养基中加入抗氧化剂可减轻褐变现象。琼脂本身不提供任何营养成分,具有无毒、可塑、遇热溶化、冷却后固形化、可使各种可溶性物质均匀分布等特性,因此是目前固体培养基中最好最常用的凝固剂。......
2023-11-20
目前,国际上流行的培养基有几十种,常用的培养基及特点如下。
1.MS培养基:MS培养基是目前普遍使用的培养基。它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适,可满足多数植物的营养和生理需要。其硝酸盐含量较其他培养基高,广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养,效果良好。有些培养基是由它演变而来的。
2.B5培养基:1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计。其主要特点是含有较低的铵,这可能是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知,有些植物在B5培养基上生长更适宜,如双子叶植物,特别是木本植物。
3.White培养基:1943年由White为培养番茄根尖而设计。1963年又作了改良,称作White改良培养基,提高了MgSO4的浓度,增加了硼素。其特点是无机盐含量较低,适于生根培养。(www.chuimin.cn)
4.N6培养基:1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计。其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。
5.SH培养基:1972年由Schenk和Hidebrandt设计。其主要特点与B5培养基相似,不用(NH4)2SO4,而改用NH4H2PO4,是矿质盐浓度较高的培养基。在很多双子叶植物和单子叶植物上使用效果很好。
6.Miller培养基:与MS培养基比较,无机盐用量减少1/3~1/2,微量元素种类减少,无肌醇。
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2023-11-20
灭菌后取出培养瓶,让培养基自然冷却凝固。经过灭菌的培养基应置于10℃下保存,特别是含有生长调节物质的培养基最好在4℃~5℃低温下保存。含吲哚乙酸或赤霉素的培养基,要在配制后的1周内用完,其他培养基最多也不应超过1个月。图3-3-1培养基的灭菌问题2经过培养基制备的实际操作,我们能否总结出培养基的配制流程?......
2023-11-20
实验十八植物组织培养培养基的配制与灭菌1.实验目的掌握植物组织培养培养基的配制方法及操作过程。⑤将培养基煮沸,趁热分装到50ml三角瓶内,每瓶15~20ml左右,用封口膜包扎瓶口后,120℃高压蒸汽灭菌15分钟。......
2023-12-07
现以MS培养基为例,说明培养液中各类物质母液制备的方法。在具体操作过程中,为了避免各种成分之间发生反应形成沉淀,一般将培养基成分中的KH2PO4、CaCl2·2H2O单独配制。表3-2-2 MS培养基微量元素母液(三)有机物质母液一般配制成200倍。表3-2-4 MS培养基铁盐母液(五)生长调节物质母液生长调节物质的用量极少,通常使用的质量浓度单位是mg/mL。......
2023-11-20
实训室应有消火栓、报警装置等安全设施。一个完整的植物组织培养实训室通常包括洗涤室、准备室、无菌操作室、培养室、温室。(三)无菌操作室(接种室)无菌操作室主要完成植物材料的消毒和接种、培养物的继代及细胞融合等工作,大小视生产规模和超净工作台的数量而定。(四)培养室图2-1-2超净工作台图2-1-3培养室培养室是将接种到培养瓶等器皿中的各种植物材料进行培养的场所。......
2023-11-20
其目的是建立无菌培养物,诱导腋芽或顶芽萌发,或产生不定芽、愈伤组织、原球茎。该阶段通常是植物组织培养中比较困难的阶段,也称为启动培养、诱导培养。其目的是使培养物大量繁殖,也称为增殖培养。......
2023-11-20
植物组培快繁的关键是植物在组织培养中再分化器官发生类型,也是组织培养中间繁殖体增殖的类型。植物组织培养中间繁殖体的类型是多种多样的,再生方式也不统一,其类型关系到繁殖速度和繁殖数量。美国红栌、叶子花、樱桃砧木等木本植物通过这种器官发生类型进行组培快繁,速度快。杨树、半夏、海棠、菊花等植物的快繁都可以通过这种器官发生类型增殖。图5-2-4原球茎发生型图5-2-5植物组织培养再分化植株的类型与繁殖途径......
2023-11-20
1838—1839年,德国植物学家Schleiden和动物学家Schwann提出的细胞学说认为:一切生物都是由细胞构成的,细胞是生物体的基本功能单位,新细胞只能由细胞分裂而来。从此之后,一批又一批植物的组织或器官通过培养的方法获得了再生植株。因此,植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。人工条件下实现的这一过程,就是植物组织培养。......
2023-11-20
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