实训室应有消火栓、报警装置等安全设施。一个完整的植物组织培养实训室通常包括洗涤室、准备室、无菌操作室、培养室、温室。（三）无菌操作室（接种室）无菌操作室主要完成植物材料的消毒和接种、培养物的继代及细胞融合等工作，大小视生产规模和超净工作台的数量而定。（四）培养室图2-1-2超净工作台图2-1-3培养室培养室是将接种到培养瓶等器皿中的各种植物材料进行培养的场所。......
2023-11-20
植物组织培养实训室设备使用及规范
【摘要】：②放入灭菌物品。溶液等物品在灭菌结束时，为了防止灭菌器自动泄压使灭菌室压力突然降低，引起瓶内液体剧烈沸腾，可在计时器结束前手动关闭电源开关，使温度和压力自然降低。
（一）洗涤设备
1.洗涤池：用于各种器具、玻璃器皿、植物材料的清洗。
2.洗瓶机：主要用于玻璃器皿的清洗。
3.冲瓶机：主要用于玻璃器皿的冲洗。
（二）制水设备
1.蒸馏水器：用以制备蒸馏水，供植物组织培养用。
以HS·ZⅡ型电热蒸馏水器为例，其安装及操作方法如下。
（1）先将冷凝器安装在蒸发锅上，注意将密封垫圈垫好，扣好压扣。
（2）用硅橡胶管接通以下水路：
①水源至冷凝器进水口。
②冷凝器出水弯管对准回水漏斗。
③漏斗泄水管至下水槽或贮水箱。
④蒸馏水出口至盛水容器。
图2-2-1 蒸馏水器
（3）关闭蒸馏水器放水龙头，开启自来水龙头，使自来水经冷凝器流入回水漏斗，并注入蒸发锅内，直至水位上升到水位镜处，暂关闭水源。
（4）开启电源开始加热，当从水位镜看到水开始沸腾时，慢慢打开水源，水流由小到大逐渐调整，开始有蒸馏水流出，一般以冷凝器回水温度在75℃以上为宜。若冷凝水流太大，会溢出回水漏斗；若冷凝水流太小，热蒸汽来不及冷凝会冲起冷凝器拦水帽。
（5）为确保蒸馏水质量，第一次使用应经过6 h的预蒸馏，以后每次使用也需30 min的预蒸馏。
（6）蒸馏水制取结束时，先关闭电源，再关闭水源。
（7）使用完毕，打开蒸馏水器放水龙头，将蒸馏水器内的剩水排干净，保持干燥清洁。
注意事项：
（1）蒸馏水器必须接好地线。
（2）水源水质必须符合生活饮用水卫生标准。
（3）在蒸馏水器制水过程中，水源不得中断，以防电热管被烧坏。
（4）蒸馏水接水胶管的管口不得浸入容器内的蒸馏水中。
（5）先加水，后通电。
（6）制水过程中人不要离开。
2.超纯水机：用以制备超纯净水，供植物组织培养研究用。
（三）化学试剂贮藏设备
1.冰箱
供贮放母液和在常温下易变性的试剂、细胞组织、植物材料；也可制取冰块，在长途采集植物材料时用于低温保存。
2.冷藏箱
供贮放母液和在常温下易变性的试剂、细胞组织、植物材料。
图2-2-2 超纯水机
图2-2-3 冷藏箱
（四）称量设备
2.电子天平
（五）培养基配制设备
1.电磁炉
用于培养液制备时物质的加热溶解。
2.磁力搅拌器
用于溶液的均匀搅拌。
3.营养液灌装机
用于营养液的快速定量分装。
4.酸度计
用于营养液酸碱度的测定。
5.恒温水槽
用于营养物质的溶解。
图2-2-4 电子天平
图2-2-5 磁力搅拌器
（六）灭菌设备
1.高压灭菌锅
用于培养基、玻璃器皿、器械用具的灭菌及无菌水的制取，置于灭菌室内。高压灭菌锅有手提式、立式、卧式等类型。
图2-2-6 恒温水槽
图2-2-7 手提式高压灭菌锅
图2-2-8 立式高压灭菌锅
图2-2-9 卧式高压灭菌锅
（1）手提式YX-280D压力蒸汽灭菌器的使用方法。
①加水。向容器内加入适量清洁水，保证水面比电热管高3～5 cm。有制备蒸馏水条件的可加入蒸馏水。
②放入灭菌物品。将需要灭菌的物品放入灭菌桶内，物品不要挤压，应留有一定空隙，以利于蒸汽渗透，保证灭菌质量。
③加盖密封。将灭菌桶放入容器内，然后把容器盖上的软管插入灭菌桶内半圆槽内，将容器盖与容器上的耳槽对正，并用扳手将6对蝶形螺栓对角线逐对拧紧，使盖与容器密合。
④加热灭菌。
a.将电源插头插入电源插座，将放气阀小手柄扳起，以排出容器内的冷空气。
b.开启预热开关，预热指示灯亮，等到有较急的蒸汽从放气阀喷出时将放气阀小手柄扳下，随着加热的继续进行，压力表的指针开始上升。
c.当压力表指针达到灭菌所需的压力位置时，将压力控制旋钮调节到灭菌所需的压力位置。
d.将定时器旋钮顺时针旋至超过所需灭菌时间约10 min，然后再回旋至灭菌所需的时间位置。
e.关闭预热开关，开启定时开关，灭菌器进入恒温恒压状态，其间加热指示灯亮、灭交替显示。
f.当达到设定灭菌时间时，加热电源自动关闭，加热指示灯灭，并发出声响以提示，此时关闭定时开关，灭菌结束。
⑤冷却。灭菌终止后先断开电源，然后用扳手慢慢扳起小手柄排汽，一定要慢，待压力表指针回到0位后再开启容器盖。
（2）WS系列卧式压力蒸汽灭菌器的安装及使用方法。WS系列卧式压力蒸汽灭菌器是利用饱和蒸汽对物品进行灭菌的设备，结构形式为卧式，加热方式为电加热及蒸汽加热，由灭菌室、夹套、外壳、门、蒸汽发生器、管路系统、控制系统、指示系统和电源系统等组成。
①安装。
a.灭菌器在安装时四周应留有余地，以便操作和维修，灭菌器门打开后的尺寸为200 cm×93 cm×182 cm。
b.灭菌器的进、出水管应分别与自来水给水管、下水排水管连接，便于日常操作。(www.chuimin.cn)
c.排气管应接至室外，以免雾气弥漫于室内，影响工作。
②使用方法
a.上水：打开水源阀。
b.上电：将电源开关推上，电源灯、进水灯亮起，开始自动进水，至高水位后进水灯熄灭，蜂鸣器响起（若需关闭蜂鸣器，可顺时针旋转计时器）。
c.摆放灭菌物品：将需灭菌的物品放置于灭菌室，物品不能挤压，以利于蒸汽渗透，保证灭菌效果。
d.密闭：将门关上，顺时针方向扳动锁紧手柄至中方位，并使撑档进入门圈内，然后顺时针方向旋转手轮转盘，使门和垫圈密合，当听到声响时，说明门已密合，此时门指示灯亮起。
e.设置灭菌温度和时间：根据灭菌物品进行选择。
f.启动：按启动键，此时启动灯亮、门灯亮、加热灯亮，灭菌器自动启动。
g.计时：当灭菌室温度达到所设置的温度要求时，灭菌指示灯亮起，计时器开始自动计时。
灭菌过程中各指示灯显示如下：电源指示灯亮——门指示灯亮——进水指示灯熄——启动指示灯亮——加热指示灯亮——灭菌指示灯熄（加热指示灯熄时，灭菌指示灯亮）
h.结束：当达到灭菌时间时，即计时器归零，加热、灭菌指示灯熄，蜂鸣器响起，灭菌器自动泄压，等内层压力为0时，逆时针方向旋转手轮转盘，再逆时针方向扳动锁紧手柄，使撑档移出门圈，将门开启。
溶液等物品在灭菌结束时，为了防止灭菌器自动泄压使灭菌室压力突然降低，引起瓶内液体剧烈沸腾，可在计时器结束前手动关闭电源开关，使温度和压力自然降低。但对培养基而言，可能会使高温时间过长，影响琼脂的凝固性和培养基的营养结构，因此，可在关闭电源后，慢慢地手动开启灭菌器后部的紧急阀，使热蒸汽慢慢散出。
i.冷却取物：待灭菌物品稍冷却后，将其取出并转移至接种室备用。
2.紫外线消毒车
紫外线消毒车是装有紫外线灯及灭菌定时器的可移动装置，根据紫外线照射灭菌需要，灵活使用。
3.恒温干燥箱
恒温干燥箱用于干净玻璃器皿的干燥灭菌，可以用80℃～100℃的温度，也可以用160℃～180℃的温度，进行1～3 h的高温干燥灭菌。
图2-2-10 紫外线消毒车
图2-2-11 恒温干燥箱
（七）接种室设备
1.超净工作台
用于植物组织培养材料的接种。
2.器械灭菌器
用于接种工具的消毒灭菌。
3.医用小平车
用于培养瓶的转移推送。
4.生物安全柜
操作具有感染性的实验材料时，用来保护操作者、实训室环境以及实验材料的生物安全设备。
5.洁净传递窗
安装于缓冲室至接种室之间的隔墙上，用于接种期间向接种室传递物品。
6.风淋室
安装于缓冲室的入口处，起到气闸的作用，在接种期间启用。
图2-2-12 超净工作台
图2-2-13 器械灭菌器
图2-2-14 医用小平车
图2-2-15 生物安全柜
图2-2-16 洁净传递窗
图2-2-17 风淋室
（八）培养设备
1.培养架
用于放置培养瓶。
2.空调
用于控制培养室的温度。培养室的温度一般要求常年保持（25±2）℃。
图2-2-18 培养架
图2-2-19 空调
3.加湿器
在植物材料培养期间，向室内雾化加湿，减缓培养基干缩。
4.智能环境控制系统
用于培养室及炼苗室光、温、水、气条件的自动控制。
5.培养箱
用于植物原生质体和酶制剂的保温或植物的暗培养，有振荡培养箱、光照培养箱、恒温培养箱等类型。振荡培养箱在液体培养时可改善通气状况。
6.电子温湿度计
用于测定培养室内的温度和湿度。
图2-2-20 加湿器
图2-2-21 振荡培养箱
图2-2-22 光照培养箱
图2-2-23 恒温培养箱
图2-2-24 电子温湿度计
（九）驯化、移栽设备
包括智能温室、移栽苗床等设施设备。
（十）观察设备
1.显微镜
2.解剖镜
用于胚胎培养、茎尖培养时剥取外植体。
图2-2-25 智能温室
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