若单击“按颜色筛选”项：展开列表，从中可按单元格颜色或按字体颜色对数据进行筛选，如图7-17所示。如果想取消对数据列表中某一列进行的筛选：单击该列的字段名右端的向下箭头，再选中“全选”复选框，然后单击“确定”按钮。如果想取消对数据列表中所有列进行的筛选：单击“数据”选项卡“排序和筛选”组的“清除”按钮。......
2023-11-23
蛋白质分子进化文库筛选策略的重要方法
【摘要】：蛋白质突变体库构建之后筛选方法的确定决定了蛋白质外定向进化的方向和成功与否，成功的筛选方法能够有效地实现基因型和表现型的连接以实现功能蛋白质的获得。除此之外，由于FCM进行筛选时，若标记底物与文库结合，则相应的细胞就被带上荧光标记，而未结合的荧光底物则可通过多次洗涤去除。因此，FCM不仅可以根据荧光强度分选出目标蛋白，还可以经过多轮筛选达到富集的效果。
蛋白质突变体库构建之后筛选方法的确定决定了蛋白质外定向进化的方向和成功与否，成功的筛选方法能够有效地实现基因型和表现型的连接以实现功能蛋白质的获得。传统的筛选策略是根据表型观察筛选，通过对细胞的生长率、生存率或底物消耗、产物生成速率等的观测筛选出目的菌株，如琼脂平板克隆筛选或粗酶裂解液的酶活检测等方法。然而，表型观察筛选法不能定量且对微小变化不灵敏，因此传统筛选方法在很大程度上限制了突变文库大小以及筛选能够达到的通量。后续发展的各类表面展示技术及流式细胞分选技术（FCM）大大提高了筛选通量。表面展示技术具有高效灵敏等特点，其中以噬菌体表面展示和酵母表面展示最常用，为蛋白质突变体库高通量筛选，尤其在抗体蛋白的研究中提供了很好的选择。各类展示技术的原理大体相似，即将表达的多肽以融合蛋白形式展现在病毒或细胞表面，并使其保持相对独立的空间结构和生物活性，借以研究多肽的性质相互识别和作用，筛选特定功能的多肽结构，实现蛋白质的定向进化。FCM能够实现单细胞的依次高速通过激光聚焦监测点，经激发光激发后产生荧光信号，根据光信号的变化来判断细胞的大小、形态以及荧光强度，并可以将需要得到的细胞亚群从中分选出来。除此之外，由于FCM进行筛选时，若标记底物与文库结合，则相应的细胞就被带上荧光标记，而未结合的荧光底物则可通过多次洗涤去除。因此，FCM不仅可以根据荧光强度分选出目标蛋白，还可以经过多轮筛选达到富集的效果。近年，微流控技术受到关注，虽然与FCM相比其筛选速度约低一个数量级，且体系组装复杂稳定性较差，但其功能灵活多样、价格低廉，因而有广泛应用潜力。(www.chuimin.cn)
有关食品生物技术的文章
- 详细阅读
-
凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量详细阅读
该法广泛应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等，而测定蛋白质的相对分子质量也是它的重要应用之一。K a v是判断分离效果的一个重要参数，同时也是测定蛋白质相对分子质量的一个依据。以蛋白质相对分子质量的对数lgMr为纵坐标，Ve为横坐标绘制标准曲线。......
2023-11-06
-
SDS-PAGE法快速测定蛋白质分子量详细阅读
如果在聚丙烯酰胺凝胶系统中加入十二烷基硫酸钠，则蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的相对分子质量，而与所带电荷和形状无关，因此可以利用SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量。因此，在电泳过程中，迁移率仅取决于蛋白质-SDS复合物的大小，也可以说是取决于蛋白质相对分子质量的大小。标准蛋白质相对分子质量见表4-1。②待测蛋白质样品的处理。......
2023-11-06
-
现代抗衰老：防止肥胖的重要方法和策略详细阅读
肥胖病与人体体质密切相关。加强锻炼是防止肥胖的重要方法和策略。肥胖病饮食养生有两方面内容。第二是确保饮食的质：即确保各种营养成分最低需要量以维持平衡，饮食养生减肥控制主食特别重要，除了体力劳动者外，一日主食应控制在300g以内。运动锻炼是防治肥胖的有效措施。单纯性肥胖病人通过锻炼3个月，体重平均减少4．3kg，腹部脂肪厚度减少1．43cm，腹围和胸围减少达3cm之多。适用于超过正常体重及高血脂人群，不适于小儿。......
2023-12-06
-
足利学校和金泽文库的重要性详细阅读
室町时代，经过镰仓管领上杉宪实的不懈努力，足利学校和金泽文库集聚了关东地区的学问家，学术活动非常兴盛。尽管如此，足利学校和金泽文库在人才、学问方面仍然远远不及京都的五山学派。足利氏的祖先足利义兼为了让族内子弟上学方便，就在关东建了足利学校和金泽文库，足利尊氏进行了扩建。与此同时，上杉宪实开始重建足利学校，并收集图书充实金泽文库，让学生们潜心学习。......
2023-08-17
-
蛋白质功效比值及膳食优质蛋白质的重要性详细阅读
蛋白质功效比值是以体重增加为基础的方法，是指实验期内，动物平均每摄入1 g蛋白质时所增加的体重克数。在实际计算某种氨基酸评分时，首先将被测食物蛋白中必需氨基酸与参考蛋白质中的必需氨基酸进行比较，比值小于1者，为限制性氨基酸。为改善膳食蛋白质质量，在膳食中应保证有一定数量的优质蛋白质。类脂在体内相当稳定，不受营养状况及机体活动影响，故称为“固定脂”或“定脂”。......
2023-12-05
-
Excel2003高级筛选和自动筛选的区别与详细阅读
高级筛选与自动筛选不同，它要求源数据以外的区域必须单独设置筛选条件，且该条件区域与源数据之间至少要空出一行或一列。图7-20 对话框图7-21 选择单元格区域单击右侧的折叠按钮，选择条件区域，如图7-22所示，再次单击折叠按钮，返回对话框。......
2023-11-02
-
蛋白质药物相对分子量及纯度测定详细阅读
实验十一蛋白质药物的相对分子量及纯度测定1.实验目的学习并掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量及蛋白质纯度的方法。该法主要依据蛋白质的分子量不同而对其进行分离。离子去污剂SDS与蛋白质的疏水部分相结合，可破坏蛋白质的折叠结构，并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS-蛋白质复合物的长度与蛋白质的分子量成正比。因此可以利用SDS-PAGE分析蛋白质的分子量及蛋白质混合物的纯度。......
2023-12-07
相关推荐