基因工程的出现一方面引起了人们的极大关注和担忧,另一方面吸引了许多科学家参与到这一崭新的研究领域。所以基因工程的大发展也就是它在多学科以及商业上的应用发展。人类基因组计划的实施就是利用基因工程手段来实现的。目前国外正在积极利用基因工程和细胞融合技术改造产生苏氨酸和色氨酸的生产菌,经改造的工程菌已正式投产,其氨基酸产量大大超过一般菌的生产能力。......
2023-11-18
基因工程的产业化方向主要在下列几方面。
(一)基因工程药物
1982年,在美国诞生了世界上第一种基因工程药物——重组人胰岛素。至今已有100多种的基因工程药物问世,已成为世界各国政府和企业投资研究开发的热点领域。现已研制出的基因工程药物主要有3类:①基因重组多肽和蛋白质类药物如干扰素、人生长激素、肿瘤坏死因子、人表皮生长因子;②酶类基因工程药物,包括尿激酶原、天冬酰胺酶、超氧化物歧化酶等,开发成功的数十种药品已广泛应用于治疗癌症、肝炎、发育不良、糖尿病和一些遗传病,并形成了一个独立的新型高科技产业;③重组抗体,特别是人源化抗体。
(二)基因诊断
人们利用基因工程技术探明致病基因的结构和功能,有助于了解致病机制,建立基因诊断、治疗技术。基因诊断直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷,因而比传统的诊断手段更加可靠。在基因诊断技术中,基因探针检测准确而灵敏,它利用DNA碱基互补的原理,采用已知的带有标记的DNA通过核酸杂交方法检测未知基因。目前各种遗传病、传染病、肿瘤等的诊断都离不开聚合酶链式反应(PCR)技术的应用。
(三)转基因植物(www.chuimin.cn)
自从1983年转基因烟草和转基因马铃薯获得成功后,基因工程技术在农业上的应用日趋完善。在提高植物抗性、改良作物品质以及作为生物反应器生产有用化合物等方面发展十分迅速。在提高抗性方面开展了多项工作,包括抗多种病毒、抗细菌和抗真菌、抗虫、抗除草剂、抗逆等。在改进作物品质方面,把豆科储藏蛋白基因转入谷类植物,把豆科、谷类作物的储藏蛋白基因转入牧草等。
(四)转基因动物
转基因动物的研究要比转基因植物更困难。现在已有转基因的牛、羊、猪、鸡、鱼等。将牛的基因导入猪体内,得到的转基因猪具有生长快、个体大、瘦肉率高、饲料利用率高等特性,具有明显的经济效益。转基因动物的另一重要方向是把动物体作为生物反应器,生产基因工程疫苗如重组乙肝疫苗、生长因子、红细胞生成素(EPO)、血清蛋白素(HSA)等。
(五)其他领域的应用研究
基因工程在其他领域的应用研究主要有酶制剂、能源工程、环保工程等方面。通过基因操作技术,改造和生产各种工业用酶,提高它们的耐热性与活性水平。在能源工业中,发展了生物能源,已利用重组DNA技术生产酒精代替石油。将酵母中与乙醇生产途径相关的基因导入大肠杆菌(途径工程,被认为是第三代基因工程),使大肠杆菌能利用甘蔗、玉米渣、木薯粉作为发酵乙醇的原料,发酵生产乙醇。在环保工业中,通过基因工程技术,构建能分解烃苯环、杂环化合物的微生物,使这些能降解有机污染物的工程菌株可应用于环保工业。
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基因工程的出现一方面引起了人们的极大关注和担忧,另一方面吸引了许多科学家参与到这一崭新的研究领域。所以基因工程的大发展也就是它在多学科以及商业上的应用发展。人类基因组计划的实施就是利用基因工程手段来实现的。目前国外正在积极利用基因工程和细胞融合技术改造产生苏氨酸和色氨酸的生产菌,经改造的工程菌已正式投产,其氨基酸产量大大超过一般菌的生产能力。......
2023-11-18
PCR的模板是含有待扩增序列的DNA或从mRNA反转录的cDNA,这个技术对模板样品要求很低,甚至没有必要对待扩增的模板进行分离纯化即可直接用于反应扩增。1988年,Saiki等成功地将热稳定的Taq DNA聚合酶应用于PCR扩增,提高了反应的特异性和敏感性,是PCR技术走向实用化的一次突破性进展。一般而言,引物设计的正确与否是PCR扩增成败的关键因素。引物的设计在PCR反应中极为重要。......
2023-11-18
双链DNA在一定条件下能够变性和复性,为DNA杂交技术的基础。Southern杂交能否检出杂交信号取决于很多原因,包括目的DNA在总DNA中所占的比例、探针的大小和标记效率、转移到滤膜上的DNA量及探针与靶DNA之间的同源情况等。存在于人基因组中的单拷贝序列现在能通过Southern杂交技术检测。它们主要区别在Southern杂交技术是以DNA为对象,而Northern杂交是以RNA为对象。......
2023-11-18
(一)基因工程的要素基因工程的操作使基因从一种生物转移到另一种生物,涉及供体、受体和载体3种基本要素。(二)基因工程的主要内容一个完整的基因工程操作过程一般包括以下几个阶段:①获得所需的目的基因;②把目的基因与所需的载体连接在一起,即重组;③把重组载体导入宿主细胞;④对目的基因的检测与鉴定;⑤目的基因在宿主细胞的表达。可控制的细胞复制和外源基因高效表达是基因工程产业化的基本要求。......
2023-11-18
然而,微生物发酵生产涉及微生物整个代谢网络中多个酶反应的协同作用。因此,代谢工程综合了基因工程、生物化学、生化工程等的最新成果,使生物学科与多门交叉学科息息相关,并被大量用于微生物发酵工业。......
2023-11-18
酸解法条件剧烈,会生成糠醛等有毒的分解产物,而且成本高,对设备有腐蚀作用,所以不宜在发酵工业上应用。生物合成法是利用微生物中的还原酶来生产木糖醇,它可有效降低木糖醇的生产成本。有研究报道了木糖醇的发酵法生产及生产中的影响因素,指出有多种微生物可产木糖醇,其中酵母最好。自然界也有一些微生物能够直接利用半纤维素进行生长,酶学分析或基因分析结果表明它们具有完善的半纤维素酶系统。......
2023-11-18
绝大多数反应是酶催化的,这些酶称为工具酶。因此,工具酶在基因工程技术中占有重要地位。限制性内切核酸酶能识别双短DNA中的特异性序列,通过切割双链DNA中每条链上的磷酸二酯酶而消化DNA,有人形象地将它比喻为基因工程的手术刀,是基因工程中不可缺少的工具酶。DNA样品中所含蛋白质,有机溶剂及RNA等杂质均会影响酶切反应的速度和酶切的完全程度,酶切的底物一般是双链DNA, DNA的甲基化位置会影响酶切反应。......
2023-11-18
菌种改良技术的进步是发酵工业发展的技术支撑。菌种选育改良的具体目标包括4部分。生产效率和效益总是排在一切商业发酵过程目标的首位,提高目标产物的产量是菌种改良的重要标准;②提高目标产物的纯度,减少副产物。广义上说,菌种改良可描述为采用各种技术手段处理微生物菌种,从中分离得到能显示所要求表型的变异菌种。......
2023-11-18
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