肠壁血管破坏：导致NASH先决条件

2023-11-16 理论教育版权反馈

【摘要】：综上所述，HFD过程中增加的内皮通透性和细菌易位表明GVB破坏是NASH发展的早期事件，通常发生在肝脏脂肪变性之前。在HFD期间观察到GVB的中断后，研究者评估了它在NASH诱导中的作用。先前已经证明，干扰内皮细胞中的Wnt/β-catenin信号通路是鼠伤寒沙门菌诱导GVB破坏的一种机制。这表明，在完整的GVB存在下，游离细菌进入肝脏的易位受到阻碍。总之，这些结果表明IEB本身的损伤不足以诱导NASH，而GVB干扰也是必需的。

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图5-5-4　内皮特异性功能增强的小鼠对脂肪变性诱导具有抵抗力

注：（A-E）β-catenin获得功能的小鼠用他莫西芬喂养2天诱导重组，然后用Ctrl饮食或HFD喂养1周或（F、G）18周；（A、B）回肠切片分析PV1的表达和（C）确定CFU。（D、E）肝脏切片在CD45（白色）和DAPI（蓝色）染色之前提交真细菌（绿色）和非EUB（红色）Fish原位杂交。侧面图像显示主图像中由正方形划分的放大区域的合并和单独染色。为每只小鼠计数细菌，并（E）测定CD45＋细胞内或外的细菌百分比。F.喂养18周后，对EAT和肝脏切片进行H&E或ORO染色分析。第一行，肝脏苏木精伊红染色；第二行，肝脏ORO染色；第三行苏木精伊红染色，测量脂肪细胞直径并显示在G。(www.chuimin.cn)

在雌性C57BL/6小鼠中进行6周的HFD喂养后也获得了类似的结果，这些小鼠也出现延迟的疾病发展和更广泛的糖尿病前期状态（图5-5-4A）。同样在这种情况下，小鼠增加了它们的体质量和内脏脂肪组织（图5-5-4B）以及在没有肝脏脂肪变性或胰岛素抵抗的情况下（图5-5-4B），它们显示肠血管内皮细胞上PV1表达增加，ZO-1表达减少（图5-5-4E）。综上所述，HFD过程中增加的内皮通透性和细菌易位表明GVB破坏是NASH发展的早期事件，通常发生在肝脏脂肪变性之前。在HFD期间观察到GVB的中断后，研究者评估了它在NASH诱导中的作用。先前已经证明，干扰内皮细胞中的Wnt/β-catenin信号通路是鼠伤寒沙门菌诱导GVB破坏的一种机制。因此，使用VE-cadherinCre［Cdh5（PAC）-creERT2］小鼠与β-catlox（Ex3）/lox（Ex3）杂交，后者包含β-catenin基因外显子两侧的2个FLOX序列，从而迫使小鼠仅在内皮细胞中激活β-catenin。服用他莫昔芬后，在Cre＋小鼠中，β-catenin的第3外显子被删除，导致β-catenin的不可降解形式和功能获得（GOF）表型。当β-连环蛋白被组成性激活时，GVB不能被干扰。使用外显子3的浮动小鼠β-catlox（Ex3）/lox（Ex3）或Cre－litterate小鼠作为对照，它们来自相同的母系（共享相同的菌群），具有相似的结果。Cre＋和Cre－小鼠喂养对照饲料或HFD1周，来评估PV1可及性。如图5-5-4A、B，HFD不能诱导β-cateninGOF小鼠PV1上调。正如预期的那样，由于GOF只发生在内皮细胞，上皮细胞不受影响，细菌在HFD后仍然可以转移到回肠和盲肠（图5-5-2C）。接下来，分析了肝脏的细菌移位，发现Cre＋β-cateninGOF小鼠在喂食HFD时与对照组小鼠相似（图5-5-4D、E）。在HFD喂养的Cre－小鼠中，可以找到游离的细菌，而不是被CD45＋免疫细胞内化，而在Cre＋小鼠中检测到的大多数细菌是在免疫细胞内。这表明，在完整的GVB存在下，游离细菌进入肝脏的易位受到阻碍。当小鼠喂食HFD较长时间，以诱导肝脏脂肪变性时，观察到Cre＋GOF小鼠没有出现脂肪细胞扩大（图5-5-4F、G），并且完全不受NAFLD的保护，如组织学和肝脏中缺乏脂质积累所示（图5-5-4F）。在Cre＋GOF小鼠中，还观察到HFD诱导的血糖水平的改善。有趣的是，HFD喂养10天导致Cre－小鼠脂肪组织中的白细胞募集，包括CD8＋T细胞和炎性单核细胞，而不是Cre＋GOF小鼠。总之，这些结果表明IEB本身的损伤不足以诱导NASH，而GVB干扰也是必需的。

肠壁血管破坏：导致NASH先决条件

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