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2023-11-09
【实验的目】
学习哺乳类动物急性实验的常规操作(动物麻醉、手术前固定、手术器械的正确使用、血管与神经的分离、动脉插管、气管插管等技术),掌握动脉血压的直接测量法。观察某些重要的神经、体液因素对动脉血压的作用。
【实验原理】
正常情况下,机体的动脉血压保持相对恒定。这种恒定是通过神经体液调节实现的。神经调节主要是心血管反射,其中最重要的是颈动脉窦和主动脉弓压力感受性反射。体液调节最主要的是儿茶酚胺类激素(如肾上腺素和去甲肾上腺素)。
【实验对象】
家兔。
【实验器材】
哺乳动物手术器械、生物信号采集系统、呼吸换能器、血压换能器、生物电放大器、兔板、注射器、手术照明灯、纱布、动脉夹、动脉插管、气管插管、刺激保护电极、1%戊巴比妥钠、生理盐水、1250U/ml肝素、1∶100000去甲肾上腺素等。
【实验内容与方法】
(1)动物准备
1)家兔捉持、称重和麻醉:家兔的捉持和称重方法参见第二章中的“动物的捉持和称重”。将1%戊巴比妥钠溶液以每公斤体重3ml,从远离耳根部位的耳缘静脉中缓慢注射,麻醉家兔。注射时密切观察动物的呼吸、心跳、肌张力、角膜反射等,以防麻醉过深而死亡。麻醉后,家兔仰卧于兔板上,四肢和门牙用绳子固定。注意颈部必须放正拉直,以利于手术。
2)颈部剪毛、手术以及分离颈总动脉、神经和气管:剪去颈部手术野的兔毛,剪下的兔毛应及时放入盛水的杯中浸湿,以免兔毛到处飞扬。在甲状软骨下缘沿正中线用手术刀切开皮肤,切口5~7cm。用止血钳逐层分离皮下组织和肌肉,暴露气管。在气管两侧深层,找到颈总动脉鞘内的颈总动脉,颈总动脉鞘内还有3根神经,最粗的是迷走神经,其次是交感神经,减压神经最细。在打开颈总动脉鞘前先仔细分辨这3根神经。用玻璃分针游离3根神经及颈总动脉,用不同颜色的丝线穿线备用。每条神经和颈总动脉分离2~3cm。注意不要过度牵拉和钳夹神经,以免神经受损。右侧颈总动脉分离约5cm,下穿两根线,分别作为结扎和固定动脉插管用。分离气管,在气管下穿线备用。
3)气管插管:在气管靠近头端用剪刀剪一倒“T”字形的切口,插入气管插管,用线固定,以保证家兔呼吸通畅。
4)动脉插管:插管前检查插管的开口处是否光滑,以防插入后戳破血管。在插管内灌注生理盐水,再注入1ml左右1250U/ml的肝素溶液,以防凝血。排净管内气泡。将右颈总动脉的远心端结扎(注意分支的甲状腺动脉,可两端结扎后剪断)。用动脉夹夹住颈总动脉的近心端,在结扎处和动脉夹之间,距离应3cm左右,便于插管。用锋利的眼科剪在靠近远心端结扎处向下作一斜形切口,约为管径的一半。然后将动脉插管向心脏方向插入颈总动脉,用已穿好的丝线结扎,并缚紧固定于插管的侧管上。保持插管和动脉的方向一致,防止血管壁被插管刺破。打开动脉夹,即可见血液冲入动脉插管中。打开橡胶管夹,血液的动脉压作用于血压换能器,即可记录血压的波动。
5)心电图电极放置:在家兔的右上肢、左右下肢上插入针式电极,分别与生物电放大器的负极、正极和接地极相连,引导家兔的心电图。
(2)仪器准备
1)按照图2-9-9连接仪器。
图2-9-9 影响动脉血压因素实验仪器连接图
2)启动计算机,进入生物信号采集应用程序窗口。(www.chuimin.cn)
3)设置信号显示通道依次为心电图、瞬时心率、动脉血压、刺激波。
【观察项目】
(1)观察并同时记录正常动脉血压、心电图和心率。在动脉血压波动中辨认心搏波(Ⅰ级波)和呼吸波(Ⅱ级波)。
(2)用动脉夹夹闭左侧颈总动脉5~10s,然后松开动脉夹。记录夹闭和放松颈总动脉前后的动脉血压、心电图和心率。在夹闭和松开颈总动脉时要即时加上标注。每个实验步骤中都要加上适当的标注,以利于实验结束后数据的统计和分析。
(3)用刺激保护电极勾在左侧减压神经上,对减压神经进行刺激,观察和记录刺激前后各通道的波形变化。
(4)由耳缘静脉注射1∶100000去甲肾上腺素1~2ml,再观察和记录刺激前后各通道的波形变化。
(5)结扎左侧迷走神经,在靠近中枢端剪断,用刺激保护电极刺激迷走神经的外周端(近心端),观察和记录刺激前后各通道的波形变化;再结扎右侧迷走神经,在靠近中枢端剪断,用刺激保护电极刺激迷走神经的外周端(近心端),观察和记录刺激前后各通道的波形变化。
(6)打印实验结果。
【注意事项】
(1)麻醉要适量。过浅,兔子会挣扎;过深,则反射不灵敏,且容易引起家兔死亡。
(2)动脉插管与动脉方向保持一致,既可使血液压力顺利传送到血压换能器,又可防止插管刺破血管。
(3)观察完每一项实验后,必须等到血压基本恢复正常时,再进行下一个实验项目。
(4)分离神经要用玻璃分针,不能牵拉神经使神经受损。
(5)经常用生理盐水湿润神经,以免影响刺激效果。
【想一想】
(1)由耳缘静脉注射1∶10000去甲肾上腺素0.1~0.2ml,分析动脉血压和心率的变化。
(2)结扎、剪断迷走神经以及电刺激迷走神经外周端,分析动脉血压和心率改变的机制。
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