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2023-11-20
【实验目的】
进一步学习家兔的静脉给药和手术方法;观察去甲肾上腺素、高浓度葡萄糖等对尿生成的影响,并分析其作用机制。
【实验原理】
尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收、肾小管和集合管的分泌与排泄。肾小球滤过受滤过膜的面积和通透性、血浆胶体渗透压、肾小球血浆流量及肾小球毛细血管血压等因素的影响,后两者又受肾交感神经以及肾上腺素和去甲肾上腺素等体液因子的影响。肾小管重吸收受小管液中溶质浓度等因素的影响。
【实验对象】
家兔。
【实验器材】
哺乳类动物手术器械、细塑料管、丝线、手术灯、纱布、量筒、1%戊巴比妥钠溶液、20%葡萄糖溶液、1∶10000去甲肾上腺素、生理盐水、注射器若干。
【实验内容和方法】
(1)动物准备
1)家兔的捉持、称重和麻醉:家兔的捉持方法参见第二章中的“动物的捉持和称重”。以1%戊巴比妥钠溶液每千克体重3ml的参考剂量,从远离耳根部位的耳缘静脉中缓慢注射,麻醉家兔。注射时密切观察动物的呼吸、心跳、肌张力、角膜反射等,以防麻醉过深而死亡,参见第二章中的“实验动物的麻醉方法”。麻醉后,家兔仰卧于兔台上,四肢和门牙用绳子固定。注意下腹部必须放正拉直,以利于手术。
2)下腹部手术:剪去下腹部手术野的兔毛,剪下的兔毛应及时放入盛水的杯中浸湿,以免兔毛到处飞扬。在耻骨联合上缘沿正中线向上做5cm长的皮肤切口,用止血钳逐层分离皮下组织和肌肉。沿腹白线切开暴露腹腔,将膀胱轻轻向外向下拉出,暴露膀胱三角,仔细辨认输尿管,并将一侧输尿管与周围组织轻轻分离,避免出血。用线将输尿管近膀胱端结扎,在结扎线的上部用眼科小剪刀剪一斜口,切口约为管径一半,把充满生理盐水的细塑料管经输尿管的斜口向肾脏方向的输尿管插入,用线结扎固定,进行导尿,可看到尿液随着输尿管的蠕动间断性地从细塑料管中逐滴流出(注意:塑料管插入输尿管管腔内,不要插入管壁肌层与黏膜之间,插管方向应与输尿管方向一致,勿使输尿管扭曲,以免妨碍尿液流出,见图2-6-5)。手术完毕后用38℃左右的生理盐水纱布在腹部切口处遮盖,以保持腹腔内温度并避免体内水分的过度流失。将细塑料管引至兔板边缘,使尿液滴在小烧杯内,用秒表计数每分钟的尿液滴数。
图2-6-5 输尿管插管的示意图(www.chuimin.cn)
(2)待尿流量稳定后,即可进行下列实验项目,每项实验开始时,都应先记录1min尿流量作为对照,然后分别进行注射各种药品,观察和记录3min内尿流量的变化(注意:记录注射药物后头3min内每1min的尿流量,而不是3min累计尿量)。
(3)从耳缘静脉注射1∶10000去甲肾上腺素0.1~0.2ml,记录尿流量的变化。
(4)由耳缘静脉注射20%葡萄糖溶液5ml,记录尿流量的变化。
(5)实验结果记录:把药液静脉注射前后,每1min的导尿量记录在表2-6-1中。
表2-6-1 尿量记录表
【注意事项】
(1)实验中需多次进行静脉注射,应注意保护兔的耳缘静脉,注射时应从远离耳根部位开始,逐渐移近耳根。亦可在实验开始前,从耳缘静脉进行静脉滴注,以后每次注射药物可从静脉滴注管注入。
(2)输尿管插管时,注意不要插入其黏膜层,并避免反复插管而损伤黏膜面造成出血,以致血液凝固堵塞输尿管。
(3)输尿管插管不能扭曲,以免引流不畅。
【想一想】
从耳缘静脉分别注射1∶10000去甲肾上腺素0.1~0.2ml和5ml20%的葡萄糖溶液,会对尿量产生什么影响?分别是通过什么生理机制实现的?
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