人体学实验指导：蟾蜍实验基本操作

2023-11-09 理论教育版权反馈

【摘要】：蛙手术器械、丝线、蛙板、搪瓷杯、器械盘、林格液、锌铜弓等。应注意勿挤压其两侧耳部突起的毒腺，以免毒液喷出射进眼中。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于大杯中。将标本放入林格液中5～10min，待其兴奋性稳定后再进行实验。测试后可用标本进行后续的实验。捣毁脑、脊髓时防止蟾蜍皮肤分泌的蟾素射入操作者眼内或污染实验标本。

【实验目的】

掌握蟾蜍的捉拿，脑、脊髓捣毁和坐骨神经腓肠肌标本制备的方法；熟悉两栖类动物的实验条件。

【实验器材】

蛙手术器械、丝线、蛙板、搪瓷杯、器械盘、林格液、锌铜弓等。

【实验内容和方法】

1.蟾蜍的捉拿蟾蜍抓取（方法见图1-3-5）宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、环指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和示指分别压住左、右前肢，右手进行操作。应注意勿挤压其两侧耳部突起的毒腺，以免毒液喷出射进眼中。

2.捣毁脑、脊髓取蟾蜍一只，用左手握住，用示指下压头部前端，拇指按压背部使头前俯。右手持探针由前端沿正中线向尾端触划，触到凹陷处即枕骨大孔。将探针由此处垂直刺入，到达椎管，将探针折向头部方向刺入颅腔，左右搅动数次，彻底捣毁脑组织；再将探针退出至刺入点皮下，针尖倒向尾侧，刺入脊髓椎管内，捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动消失，四肢肌肉张力消失，则表示脑和脊髓已完全破坏（图1-3-7）。

3.剪除躯干上部及内脏用大剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手将大剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于大杯中。

4.剥皮先剪去肛周一圈皮肤，然后用左手捏住脊柱断端，右手剥离断端边缘皮肤，逐步向下剥离全部后肢皮肤。将标本置于盛有林格液的小杯中，洗净双手和用过的器械。(www.chuimin.cn)

5.游离坐骨神经将蟾蜍下半身腹侧向上用蛙足钉固定于蛙板上。沿脊柱两侧用玻璃分针分离坐骨神经，并于靠近脊柱处穿线、结扎并剪断。轻轻提起结扎线，逐一剪去神经分支。游离坐骨神经后将下半身背侧向上固定于蛙板上，用玻璃分针在股二头肌与半膜肌之间的裂缝处划开，循坐骨神经沟找出大腿部分的坐骨神经，用玻璃分针将腹部的坐骨神经小心勾出来。游离神经过程中不要使用镊子，以免损伤神经和肌肉。手执结扎神经的线，剪断坐骨神经的所有分支，一直游离至膝关节（图1-3-19）。

6.制备坐骨神经腓肠肌标本将分离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪断全部大腿肌肉，并用大剪刀将股骨刮净。再在跟腱处以线结扎、剪断并游离腓肠肌至膝关节，在膝关节以下将小腿其余部分全部剪断，并在股骨的上部剪断（留1cm长的股骨以便固定标本）。将标本放入林格液中5～10min，待其兴奋性稳定后再进行实验。

7.测试坐骨神经腓肠肌标本的兴奋性先用锌铜弓浸入林格液中，然后取出锌铜弓接触坐骨神经腓肠肌标本的坐骨神经，观察腓肠肌是否有明显的单收缩，以此证明标本的兴奋性是否较高。测试后可用标本进行后续的实验。

【注意事项】

（1）制备神经肌肉标本过程中，要不断滴加林格液，以防标本干燥，丧失正常生理活性。

（2）操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或用镊子夹伤神经肌肉。

（3）捣毁脑、脊髓时防止蟾蜍皮肤分泌的蟾素射入操作者眼内或污染实验标本。

人体学实验指导：蟾蜍实验基本操作

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