糖酵解中间产物鉴定实验的结果

2023-11-04 理论教育版权反馈

【摘要】：实验类型综合性教学时数 3一、实验目的通过本实验对糖酵解过程进一步加深理解。通过碘乙酸和硫酸肼的作用，了解使中间产物堆积的方法在研究中间代谢的意义。

实验类型综合性

教学时数 3

一、实验目的

（1）通过本实验对糖酵解过程进一步加深理解。

（2）初步了解碘乙酸对酶的抑制作用。

（3）通过碘乙酸和硫酸肼的作用，了解使中间产物堆积的方法在研究中间代谢的意义。

二、实验原理

利用碘乙酸对糖酵解过程中3—磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用，使3—磷激甘油醛不再向前变化而积累。硫酸肼作为稳定剂，用来保护3—磷酸甘油醛使不自发分解。然后用2，4—二硝基苯肼与3—磷酸甘油醛在碱性条件下形成2，4—二硝基苯肼—丙糖的棕色复合物，其棕色程度与3—磷酸甘油醛含量呈正比。

三、实验仪器与试剂

1.材料

新鲜酵母。

2.仪器

恒温水浴锅、离心机、电子天平、试管、移液管、玻璃棒。

3.试剂

2，4—二硝基苯肼溶液，0.56mol/L硫酸肼溶液，5%葡萄糖溶液，10%三氯乙酸溶液，0.75mol/L NaOH溶液，0.002mol/L碘乙酸溶液。(www.chuimin.cn)

四、实验内容

1.发酵过程观察

取干燥试管3支，编号1～3，分别加入0.2g酵母，再按下表所示加入试剂。

加完葡萄糖后每支试管立刻分别插入玻璃棒1支，搅拌均匀，玻璃棒留在试管中，在37℃保温时用留在试管中的玻璃棒间断搅拌1～2次。

2.终止发酵和补加试剂

37℃保温45min后，按下表所示添加试剂。

加完试剂后，立刻用原来留在试管中的玻璃棒搅拌，这时发酵终止，取出玻璃棒。

3.发酵液过滤

上述3支试管分别过滤，取滤液用于显色鉴定。

4.显色鉴定

取3支试管，按下表所列顺序加入试剂，观察各管颜色的深浅，记录。

五、思考题

实验中哪一发酵管生成的气泡最多？哪一管最后生成的颜色最深？为什么？