酶活力影响因素实验结果

2023-11-04 理论教育版权反馈

【摘要】：实验类型验证性教学时数 3操作视频一、实验目的了解pH、温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响。对一种酶来说，只能在一定的pH范围表现其活力，否则酶即失活。酶通常在某一特定pH时，表现最大活力，此时的pH称为酶的最适pH。

实验类型验证性

教学时数 3

操作视频

一、实验目的

（1）了解pH、温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响。

（2）学习测定酶最适pH的方法。

二、实验原理

对环境敏感是酶的特性之一。对一种酶来说，只能在一定的pH范围表现其活力，否则酶即失活。而且，在这个pH范围内，酶的活性也会随环境pH的改变而变化。酶通常在某一特定pH时，表现最大活力，此时的pH称为酶的最适pH。一般酶的最适pH在4～8。

酶的催化作用受到温度的影响也很大，提高温度一般可以提高酶促反应的速度。但是，大多数酶是蛋白质，温度过高会引起蛋白质变性，导致酶的失活。酶促反应速度达到最大值时的温度成为酶的最适温度，大多数动物酶的最适温度为37～40℃。

某些物质可以增加酶的活力，称为酶的激活剂；有些物质则可以降低酶的活力，称为酶的抑制剂。例如，Cl^-为唾液淀粉酶的激活剂，Cu²⁺为唾液淀粉酶的抑制剂。

淀粉遇碘呈蓝色，糊精按分子质量大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精和麦芽糖遇碘不显色。因此，可以根据与碘反应的颜色变化来判断淀粉被淀粉酶水解的程度。

三、实验仪器与试剂

1.仪器

恒温水浴锅。

2.试剂(www.chuimin.cn)

唾液液淀粉酶溶液、1%淀粉溶液（含0.3%氯化钠）、1%淀粉溶液（不含氯化钠）、0.2mol/L Na₂HPO₃溶液、0.1mol/L柠檬酸溶液、1% NaCl溶液、1%CuSO₄溶液、1% Na₂SO₄溶液、KI-I₂溶液。

四、实验内容

1 . pH对酶活力的影响

（1）取试管6支，编号，按下表准确添加0.2mol/L Na₂HPO₃溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液，制备pH5.0～8.0的不同缓冲液。

（2）向以上试管中加入1%淀粉溶液（含0.3%氯化钠）2mL。

（3）向第6号试管中加入唾液淀粉酶溶液2mL，混匀后放入37℃水浴锅。每隔1min由6试管中吸取1滴混合液，滴入白瓷板中，再滴加1滴KI-I₂溶液，检测淀粉的水解程度。直至反应颜色为黄色，取出试管，记录孵育时间。

（4）以1min为间隔，依次向第1～5号试管加入唾液淀粉酶溶液2mL，混匀，并以1min为间隔依次放入37℃水浴锅中。然后，按照步骤3中记录的孵育时间依次将5支试管中的反应溶液滴入白瓷板，与KI-I₂溶液反应。判断在不同pH下淀粉被水解的程度，并确定最适pH。

2.温度对酶活力的影响

取3支试管，编号，按下表操作：

3.激活剂和抑制剂对酶活力的影响

取3支试管，编号，按下表操作：

五、思考题

（1）在测定pH对酶活力影响的实验中如何准确控制反应时间？

（2）在激活剂和抑制剂对酶活力影响的实验中Na₂SO₄溶液对照组的作用是什么？