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2023-11-22
实验类型 验证性
教学时数 3
操作视频
一、实验目的
(1)理解酶的专一性。
(2)掌握验证酶的专一性的实验方法。
(3)学习科学设计实验对照的方法。
二、实验原理
酶的专一性(Enzyme Specificity)是指酶对底物及其催化反应的严格选择性。通常酶只能催化一种化学反应或一类相似的反应,不同的酶具有不同程度的专一性,酶的专一性可分为三种类型:绝对专一性、相对专一性、立体专一性;也可分为:结构专一性和立体异构专一性。如淀粉酶只能催化淀粉水解,对蔗糖的水解并无催化作用。淀粉水解产物为葡萄糖,蔗糖水解产物为果糖及葡萄糖,水解产生的葡萄糖和果糖的半缩醛基均可与Benedict试剂反应,生成氧化亚铜的砖红色沉淀。利用Benedict试剂的颜色反应可验证淀粉或蔗糖是否水解。
本实验通过观察唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉及蔗糖的催化作用,验证酶的专一性。
三、实验仪器与试剂
1.仪器
恒温水浴锅、移液管、离心管、量筒等。
2.试剂(www.chuimin.cn)
(1)唾液淀粉酶溶液 先用蒸馏水漱口,再含10mL左右蒸馏水,轻轻漱动,约2min后吐出收集在烧杯中,即得清澈的唾液淀粉酶原液,根据酶活高低稀释50~100倍,即为唾液淀粉酶溶液。
(2)蔗糖酶溶液 取1g干酵母放入研钵中,加入少量石英砂和水研磨,加50mL蒸馏水,静置片刻,过滤即得。
(3)Benedict试剂 溶解85g柠檬酸钠和50g Na2CO3·2H2O于400mL蒸馏水中;另溶8.5g CuSO4·5H2O于50mL热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠—碳酸钠溶液中,边加边搅匀,如有沉淀可过滤除去,此试剂可长期保存。
(4)其他试剂 2%蔗糖,1%淀粉溶液(含0.3%氯化钠)。
四、实验内容
1.淀粉酶的专一性
取3支试管,编号,按下表操作。
2.蔗糖酶的专一性
取3支试管,编号,按下表操作。
五、思考题
(1)观察酶的专一性为什么设计3管实验?蒸馏水管的作用是什么?
(2)如果将酶沸水加热10min后重复上面的实验,会有怎样结果?为什么?
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