废弃烟叶经预处理后加入一定量蒸馏水,用超声波法进行提取,提取液在4℃、8000r/min条件下离心15min,取上清。得出超声波法提取废弃烟叶多糖的最佳工艺为:A3B1C1D2,即在功率600W、提取时间4min、液料比1∶25、温度60℃时,废弃烟叶多糖有最大提取率,为2.56%。将组分1和组分2分别收集,经浓缩,透析和冷冻干燥后,得到废弃烟叶多糖纯品。......
2023-10-28
多糖的提取和精制过程如下。
(1)除烟叶色素 称取50g烟末,分别用500mL乙酸乙酯和丙酮在索氏提取器中浸提至溶液无明显颜色变化,取出烟末,烘干。
(2)沉淀多糖 用500mL pH为8的磷酸缓冲液(NaH2PO4-Na2HPO4)提取两次,得到的沉淀使用高压灭菌锅121℃下高压水蒸气浸提0.5h,沉淀用500mL 0.02% NaBH4+0.4% NaOH的混合水溶液(质量分数,下同)浸提12h,离心留沉淀。
(3)浓碱提取 将(2)最后的沉淀用500mL 0.05% NaBH4+5% NaOH混合溶液浸提24h,离心,保留上清液,沉淀继续重复此步骤一次,合并两次上清液,得到粗多糖提取液。(www.chuimin.cn)
(4)除多糖色素 用36%的乙酸将上清液的pH调至7左右,然后用氨水调pH至8~9,逐滴加入H2O2并搅拌,每次加入10~15mL,搅拌4h,重复多次,每次保持pH在8~9,至溶液颜色无较大变化为止。
(5)多糖的精制 将溶液旋转蒸发浓缩,透析袋透析4d,将透析液旋转蒸发浓缩,转移至培养皿中,冷冻干燥得到粗多糖。将粗多糖溶解于200mL水中,过滤除去沉淀,在水溶液中逐滴多次加入丙酮以沉淀多糖,离心得沉淀,冷冻干燥得精制多糖,多糖提取率为9.29%,苯酚-硫酸法测得多糖的纯度为96.85%。
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2023-10-28
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2023-10-28
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2023-10-28
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