甜菜碱、肉碱和乙酰肉碱的测试方法

2023-07-02 理论教育版权反馈

【摘要】：但离子对的方法不能将肉碱和巴豆甜菜碱分离开，而巴豆甜菜碱又是肉碱的分解成分，含有一对共轭双键，所以紫外吸收强度在210 nm 处是肉碱的200倍。也就是说，假如肉碱中有0.5%的巴豆甜菜碱不能被色谱分离开，那么测出的结果就可能达到200%。②标准液的配制：准确称取20 mg甜菜碱、肉碱和乙酰肉碱标准品，转入50 mL容量瓶中，加入30 mL水，振荡至标准品全部溶解，加入1.0 m L巴豆甜菜碱原始液，再加水至刻度，摇匀后即可注射。

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从分子结构可以看出以上4个分子都是碱性的，简单的测试方法是在移动相中加入阴离子（如己烷基磺酸盐），这样可与碱性的待测阳离子形成离子对，延长待测分子的保留时间（参见第1章“移动相的应用”）。但离子对的方法不能将肉碱和巴豆甜菜碱分离开，而巴豆甜菜碱又是肉碱的分解成分，含有一对共轭双键，所以紫外吸收强度在210 nm 处是肉碱的200倍。也就是说，假如肉碱中有0.5%的巴豆甜菜碱不能被色谱分离开，那么测出的结果就可能达到200%。

为了能把以上4个化合物全部分开，这里采用了离子交换的方法。用阳离子交换柱作固定相，氯化铵水溶液和乙腈的混合液作移动相。在低p H 溶液中，氯化铵解离成NH+4和Cl-。NH+4和待测的阳离子与阳离子交换柱都有作用力，这样NH+4和待测阳离子形成竞争。增大NH+4的浓度，就可以使被测离子较快地被洗脱出来。所以调节移动相中NH+4的浓度可以使被测离子得到最佳的保留时间及分离效果。