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缬氨酸的有效测试方法

【摘要】:缬氨酸是人体必需的8种氨基酸之一。缬氨酸的等电点是5.96,本方法将移动相的p H 调至2.0,远小于等电点,所以整个缬氨酸是带正电的。用己烷基磺酸作离子对就可以延长保留时间。②样品液的配制:称取一定量含有约10 mg缬氨酸的样品,转入50 m L容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,再加水至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

缬氨酸(valine)是人体必需的8种氨基酸之一。缬氨酸的等电点是5.96,本方法将移动相的p H 调至2.0,远小于等电点,所以整个缬氨酸是带正电的。用己烷基磺酸作离子对就可以延长保留时间。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取10 mg缬氨酸标准品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L水,振荡至标准品全部溶解,再加水至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:称取一定量含有约10 mg缬氨酸的样品,转入50 m L容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,再加水至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®HSS Ts C18,1.8μm,2.1×150 mm

流速:0.4 m L/min

注射量:2.0μL

UV检测波长:210 nm

移动相A:10 mmol/L己烷基磺酸钠,p H 2.0

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

(续表)

图5-21 缬氨酸的色谱图

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)