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孕烯醇酮检测方法优选

【摘要】:孕烯醇酮有治疗类风湿关节炎等的功效。孕烯醇酮是非极性化合物,可用反相色谱柱加以分离。另外孕烯醇酮仅含有两个不共轭的双键,紫外吸收不是很强,所以标准溶液和样品溶液的浓度都要配得高一些。②样品液的配制:称取一定量含有约10 mg孕烯醇酮的样品,转入50 mL容量瓶中,加入5 m L水,超声5 min,再加入25 mL异丙醇,超声15 min,冷却后再加入乙醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

孕烯醇酮(pregnenolone)有治疗类风湿关节炎等的功效。

孕烯醇酮是非极性化合物,可用反相色谱柱加以分离。另外孕烯醇酮仅含有两个不共轭的双键,紫外吸收不是很强,所以标准溶液和样品溶液的浓度都要配得高一些。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取10 mg孕烯醇酮标准品,转入50 m L容量瓶中,加入30 mL乙醇,超声至标准品全部溶解,冷却后再加入乙醇至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:称取一定量含有约10 mg孕烯醇酮的样品,转入50 mL容量瓶中,加入5 m L水,超声5 min,再加入25 mL异丙醇,超声15 min,冷却后再加入乙醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®BEH C18,1.7μm,2.1×150 mm

流速:0.4 m L/min

注射量:2.0μL

UV检测波长:215 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

图5-19 孕烯醇酮的色谱图

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)