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多酚化合物测试方法大全

【摘要】:③样品液的配制:称取一定量约含有25 mg多酚化合物的样品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,若需要可以延长至10 min,冷却后再加水至刻度,摇匀。

多酚化合物与福林酚(folin-ciocalteu)试剂发生反应后溶液显蓝色,颜色的强度与多酚分子上的羟基成正比。由样品溶液在760 nm 波长(蓝色)处吸收强度与标准液在该处的吸收强度的比值,就可以算出样品液的浓度。

该方法有一定的局限性。第一,在定性方面,福林酚不仅能与多酚类化合物反应显蓝色,还能与其他一些还原剂发生反应显蓝色,所以该方法选择性不强。第二,在定量方面,由于多酚化合物的羟基数不与相对分子质量呈线性关系。比如本方法所用的标准品是没食子酸,相对分子质量为170,羟基数为3;而鞣花酸相对分子质量为302,羟基数为4,所以定量计算也会有偏差。但作为工业界一个约定俗成的方法,也被广泛地使用。

(1)测试步骤

①试剂:

没食子酸(gallic acid)标准品

福林酚试剂(2 mol/L)    Sigma F9252

20%碳酸钠溶液:50 g无水碳酸钠经超声溶解于200 mL水中。

②标准液的配制:准确称取25 mg没食子酸标准品,转入50 m L容量瓶中,加入30 mL水溶解标准品,然后加水至刻度,摇匀。

③样品液的配制:称取一定量约含有25 mg多酚化合物的样品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,若需要可以延长至10 min,冷却后再加水至刻度,摇匀。去掉瓶颈部分的液体,然后离心或过滤10 m L溶液。

④氧化反应:分别移取1 mL水、1 mL标准液和1 mL样品液至3个不同的100 mL容量瓶中,在每个容量瓶中加入约50 m L水,摇匀,加入5 mL福林酚试剂和15 mL 20%碳酸钠溶液,再加水至刻度,摇匀后放置2 h。

(2)用紫外/可见光谱仪来测定以上溶液在760 nm 处的吸收值(

3)结果计算

A:样品液在760 nm 处的吸收值

A:标准液在760 nm 处的吸收值

A:空白液在760 nm 处的吸收值

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)