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依布硒啉的可靠测试方法介绍

【摘要】:②样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约5 mg依布硒啉的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声5 min,再加入50 m L甲醇,超声15 min,冷却后再加入甲醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。HPLC条件依布硒啉是碱性化合物,为了不让它与固定相硅胶表面的硅羟基起作用,引起色谱峰的拖尾,这里用了C16 Amide柱。由于在C16的底部有碱性的酰胺基团,使碱性的依布硒啉不能靠近硅胶表面,避免依布硒啉与硅胶表面羟基产生不规则的作用力。

依布硒啉(ebselen)是合成的有机硒化合物,有消炎和抗氧化的功能。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg依布硒啉标准品,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL甲醇,振荡至标准品全部溶解,再加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约5 mg依布硒啉的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声5 min,再加入50 m L甲醇,超声15 min,冷却后再加入甲醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)HPLC条件

依布硒啉是碱性化合物,为了不让它与固定相硅胶表面的硅羟基(silicanol)起作用,引起色谱峰的拖尾,这里用了C16 Amide柱。

由于在C16的底部有碱性的酰胺基团,使碱性的依布硒啉不能靠近硅胶表面,避免依布硒啉与硅胶表面羟基产生不规则的作用力。

如没有C16 Amide柱,可在移动相里加入10 mmol/L的己烷基磺酸盐作为离子对,也可以起到同样的效果。

色谱柱:Supelcosil Discovery RP-Amide C16,4.6×150 mm

流速:1.0 m L/min

注射量:10.0μL

UV检测波长:325 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:甲醇

柱温:室温

梯度

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)