首页 理论教育胆碱的测试方法:从检测血液中胆碱开始探讨

胆碱的测试方法:从检测血液中胆碱开始探讨

【摘要】:胆碱是强碱性的有机分子,没有双键,没有特征性的UV 吸收,所以反相色谱-UV检测器无法测试胆碱。从分子结构来看,胆碱在水溶液中应该是阳离子,所以可以用阳离子交换柱来把它和其他化合物分离;同时应具有电导性,所以可以用电导检测器来检测胆碱分子。②样品液的配制:称取约含有10 mg胆碱的样品,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL水,摇15 min,超声5 min,再加水至刻度,摇匀后离心10 min。

胆碱是强碱性的有机分子,没有双键,没有特征性的UV 吸收,所以反相色谱-UV检测器无法测试胆碱。

从分子结构来看,胆碱在水溶液中应该是阳离子,所以可以用阳离子交换柱来把它和其他化合物分离;同时应具有电导性,所以可以用电导检测器来检测胆碱分子。本方法用阳离子交换柱连接电导检测器来测试胆碱。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取10 mg胆碱标准品,转入100 m L容量瓶中,加水溶解后,再加水至刻度,摇匀。移取2 mL溶液至10 mL容量瓶中,加水至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:称取约含有10 mg胆碱的样品,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL水,摇15 min,超声5 min,再加水至刻度,摇匀后离心10 min。移取2 mL清液至10 mL容量瓶中,加水至刻度,摇匀后即可注射。

(2)离子色谱条件

色谱柱:Dionex IonPac®CS 14,4×250 mm

离子抑制器:Dionex CSRS 4 mm

离子抑制器电流:100 m A

洗脱液:40 mmol/L甲磺酸

流速:1 mL/min

注射量:25μL

走样时间:10 min结束

(3)结果计算

A:胆碱标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)