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α-酮戊二酸的检测方法

【摘要】:α-酮戊二酸是谷氨酸的前驱物,在酶的作用下能转化成谷氨酸。α-酮戊二酸还能带走体内过量的氨,起到消除体内毒素的作用。α-酮戊二酸常被用在运动保健品中,帮助运动员达到顶峰状态。②样品液的配制:称取约含有30 mgα-酮戊二酸的样品,转入50 m L容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,再摇5 min,冷却后加水至刻度,摇匀后离心,取上层清液即可注射。

α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid)是谷氨酸的前驱物,在酶的作用下能转化成谷氨酸。α-酮戊二酸还能带走体内过量的氨,起到消除体内毒素的作用。α-酮戊二酸常被用在运动保健品中,帮助运动员达到顶峰状态。

α-酮戊二酸是含有两个酸根的极性化合物,为了能在反相柱中延长保留时间,可以降低移动相的p H,也可用离子对的方法(如在移动相中加入季铵盐,提高p H)来延长保留时间,起到好的分离效果。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取30 mgα-酮戊二酸标准品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L水,振荡使标准品完全溶解,再加水至刻度,摇匀即可注射。

②样品液的配制:称取约含有30 mgα-酮戊二酸的样品,转入50 m L容量瓶中,加入30 m L水,超声5 min,再摇5 min,冷却后加水至刻度,摇匀后离心,取上层清液即可注射。

(2)色谱条件

色谱柱:Acquity Hss T3 C18,1.8μm,2.1×150 mm

流速:0.4 m L/min

注射量:2μL

UV检测波长:210 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液,p H 2.0

移动相B:乙腈

移动相A∶移动相B=97∶3

测试时间:10 min

如遇干扰可改用以下离子对的方法:

色谱柱:Acquity Hss T3 C18,1.7μm,2.1×150 mm

流速:0.4 m L/min

注射量:2μL

检测器波长:210 nm

柱温:45℃

移动相A:5 mmol/L四丁基氯化铵水溶液,p H 5.5

移动相B:乙腈

梯度

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)