黄芩含有多种黄酮及黄酮苷，其中含量最多的是黄芩苷和黄芩素。反相色谱柱可以有效分离这两种化合物，并可进行定量测试。②样品液的配制：称取一定量约含有2 mg黄芩苷的样品，转入100 m L容量瓶中，加入10 mL水，振荡5 min，超声2 min，加入60 m L乙醇，再超声10 min（提取物）或40 min（原草），冷却后加入甲醇至刻度，摇匀后离心10 min，移取上层清液即可注射。......
2023-07-02
螺旋藻测试的最佳方法
【摘要】：螺旋藻含有藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，有抗氧化和提高免疫力的功效。藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白都是大分子，用色谱法分离和定量测试有困难。在作定量计算前必须确认在600～700 nm 区域内样品的吸收光谱和螺旋藻标准品的光谱相似，以防掺有色素的假冒伪劣产品。
螺旋藻（spirulina）含有很多营养成分，如蛋白质、维生素、金属元素、类胡萝卜素等，蛋白质是螺旋藻的主要营养成分。螺旋藻含有藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白，有抗氧化和提高免疫力的功效。
藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白都是大分子，用色谱法分离和定量测试有困难。本方法是根据Yoshikawa&Belay［5］的方法修改而来的。
（1）测试步骤
标准溶液和样品溶液的配制：把样品打碎成粉末，称取300 mg螺旋藻标准品，以及相当于300 mg螺旋藻标准品的样品，分别转入不同的50 mL离心管中，分别加入25 m L 100 mmol／L磷酸钠p H 6.0的缓冲剂，用搅棒搅匀，在30℃下培养16 h。然后用搅棒搅匀后，分别离心10 min，移取1 m L清液至50 mL容量瓶中，加入100 mmol／L磷酸钠p H 6.0的缓冲剂至刻度，摇匀。若需要，可用100 mmol／L磷酸钠p H 6.0的缓冲剂进一步稀释。
（2）紫外／可见光仪读数
移取1 mL标准液或样品液至1 cm的光谱管中，分别作紫外／可见光扫描（300～700 nm）。标准液或样品液的最大吸收应该在0.3～0.9范围内，若超出范围应进一步稀释或调整。
在作定量计算前必须确认在600～700 nm 区域内样品的吸收光谱和螺旋藻标准品的光谱相似，以防掺有色素的假冒伪劣产品。
螺旋藻的藻蓝蛋白的浓度和别藻蓝蛋白的浓度之比应该是70∶30左右。
（3）结果计算
计算公式如下：
样品最大吸收（620 nm）=C C×7.20+C A×3.91
样品最大吸收（650 nm）=C C×1.67+C A×6.45
620 nm：藻蓝蛋白最大吸收波长
650 nm：别藻蓝蛋白最大吸收波长
C C：藻蓝蛋白的浓度（mg／m L）
C A：别藻蓝蛋白的浓度（mg／mL）
7.20：1 mg／m L藻蓝蛋白在620 nm 处的吸收度
3.91：1 mg／mL别藻蓝蛋白在620 nm 处的吸收度
1.67：1 mg／mL藻蓝蛋白在650 nm 处的吸收度
6.45：1 mg／mL别藻蓝蛋白在650 nm 处的吸收度
以上公式可转换如下：
设C C为X；C A为Y
设样品最大吸收（620 nm）为A
设样品最大吸收（650 nm）为B
得：
A=X×7.20+Y×3.91
B=X×1.67+Y×6.45
解以上二元一次方程组，得：
藻蓝蛋白的浓度（X）=0.162A-0.098B
别藻蓝蛋白的浓度（Y）=0.18B-0.042A
以上就是计算藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白含量的公式。
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