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锯棕榈中脂肪酸的测试方法优化

【摘要】:锯棕榈产品是男性前列腺的保养品,其中所含的脂肪酸特别是短链脂肪酸是锯棕榈的活性和标志性成分。

棕榈(saw palmetto)产品是男性前列腺的保养品,其中所含的脂肪酸特别是短链脂肪酸(C4~C10)是锯棕榈的活性和标志性成分。

(1)测试步骤

①内标液的配制:准确称取100 mg正十九烷,溶解于100 mL正己烷中。

②标准液的配制:准确称取50 mg月桂酸甲酯和油酸甲酯,10 mg亚油酸甲酯,以及4 mg己酸甲酯、辛酸甲酯、癸酸甲酯、棕榈油酸甲酯、硬脂酸甲酯和亚麻酸甲酯等标准品,转入50 mL容量瓶中,加入30 mL内标液,超声至全部标准品溶解,再加内标液至刻度,摇匀后即可注射。

③样品的准备:

由于锯棕榈的脂肪酸是以不同酯的形式存在的,所以先要把锯棕榈所含的脂肪酸酯水解成游离脂肪酸,然后甲基化以降低沸点,使能用GC来分离及定量测试各个不同的脂肪酸甲酯,最后用相对分子质量之比计算游离脂肪酸的含量。

准确称取100 mg粉碎的锯棕榈果,转入100 m L圆底回流瓶中,加入10 mL 0.5 mol/L氢氧化钠甲醇溶液,加入一个小旋转磁棒,加热回流45 min,再通过冷凝管加入5 m L三氟化硼甲醇溶液,继续回流3 min,再通过冷凝管加入5 mL内标液,1 min后停止回流。用凉水冷却回流瓶,冷却后取下回流瓶,加入15 m L饱和氯化钠水溶液,盖上回流瓶,剧烈摇动回流瓶10~20 s。静置回流瓶直至分层完成,移取1 mL上层溶液至2 m L注射瓶中,待注射。

(2)GC条件

色谱柱:Restek Stabil Wax,30 m×0.25 mm,0.25μm

注射器温度:250℃

检测器(FID)温度:300℃

注射量:1μL

烘箱温度:0~3 min为120℃,3 min后线性增加温度(5℃/min)直至220℃,保持12 min。

(3)结果计算

C:相应脂肪酸在标准液中的浓度(mg/m L)

R u:样品液中相应脂肪酸峰面积/样品液中内标峰面积

R s:标准液中相应脂肪酸峰面积/标准液中内标峰面积

M a:相应的游离脂肪酸的相对分子质量

M e:相应的脂肪酸甲酯的相对分子质量

W:样品的质量(mg)

5:样品液的体积(5 m L)