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番泻苷A和B的测试方法优化

【摘要】:而番泻苷A和B等蒽醌类成分是其发挥药理作用的主要活性成分。测试步骤①标准液的配制:准确称取5 mg番泻苷A或番泻苷B标准品,转入100 mL容量瓶中,加入60 m L乙腈/水混合液,振荡至标准品全部溶解,再加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。②样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约5 mg番泻苷A 或番泻苷B的样品,转入100 m L容量瓶中,加入60 m L 80℃的热水,振荡10 min,冷却后加入甲醇至刻度,摇匀,离心5 min,吸取清液即可注射。

番泻苷为豆科植物狭叶番泻或尖叶番泻的提取物,常用的泻下药之一。而番泻苷A和B等蒽醌类成分是其发挥药理作用的主要活性成分。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg番泻苷A或番泻苷B标准品,转入100 mL容量瓶中,加入60 m L乙腈/水(50∶50)混合液,振荡至标准品全部溶解,再加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制(原草样品):称取一定量碾碎的含有约5 mg番泻苷A 或番泻苷B的样品,转入100 m L容量瓶中,加入60 m L 80℃的热水,振荡10 min,冷却后加入甲醇至刻度,摇匀,离心5 min,吸取清液即可注射。

样品液的配制(提取物样品):称取一定量碾碎的含有约5 mg番泻苷A 或番泻苷B 的样品,转入100 m L容量瓶中,加入15 mL水,超声5 min,再加入45 m L乙腈/水(50∶50)混合液,超声5 min,冷却后加入乙腈/水(50∶50)混合液至刻度,摇匀,离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®HSS T3,1.8μm,2.1×150 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:1.0μL

UV检测波长:270 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

(3)结果计算

A:标准液中番泻苷A的峰面积

A:样品液中番泻苷A的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :番泻苷A标准品的质量(mg)

A:标准液中番泻苷B的峰面积

A:样品液中番泻苷B的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :番泻苷B标准品的质量(mg)