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简单易懂,科学有效的萝卜硫苷测试方法

【摘要】:萝卜硫苷是酸性化合物,在反相柱中的保留时间较短,在复杂的基质中很可能会受到干扰。建议用离子对的方法,移动相中加入强碱性的阳离子,与萝卜硫苷形成中性离子对,以此来延长保留时间,得到更好的分离效果。③样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约10 mg萝卜硫苷的样品,加入100 m L溶剂A,转入搅拌机,搅拌5 min,取一部分样品液至离心管中,离心5 min,吸取清液即可注射。

据现代科学研究,西兰花、芥蓝等十字花科植物中所含的萝卜硫苷是常见的抗氧化剂,可能有抗癌、降胆固醇等功能。

萝卜硫苷是酸性化合物,在反相柱中的保留时间较短,在复杂的基质中很可能会受到干扰。本方法用的是一般的反相色谱法,在测试复杂样品时可能会有问题。建议用离子对的方法,移动相中加入强碱性的阳离子(如四丁基铵盐等),与萝卜硫苷形成中性离子对,以此来延长保留时间,得到更好的分离效果。参见第1章“移动相的应用”。

(1)测试步骤

①溶剂A的配制:等量混合水、DMSO、DMF和乙腈4种溶剂。

②标准液的配制:准确称取10 mg萝卜硫苷标准品,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL水,振荡至标准品全部溶解,再加水至刻度,摇匀后即可注射。

③样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约10 mg萝卜硫苷的样品,加入100 m L溶剂A,转入搅拌机,搅拌5 min,取一部分样品液至离心管中,离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®HSS T3,1.8μm,2.1×150 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:2.0μL

UV检测波长:225 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)