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黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷测试方法优化

【摘要】:黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根,含有黄酮类成分,其中以毛蕊异黄酮葡萄糖苷活性最高,具有抗病毒、降血脂、抗氧化等作用。②样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约5 mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声5 min,再加入50 mL乙醇,超声10 min(提取物)或40 min(原草),冷却后加入甲醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根,含有黄酮类成分,其中以毛蕊异黄酮葡萄糖苷活性最高,具有抗病毒、降血脂、抗氧化等作用。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷(4′-hydroxy-3′-methoxyisoflavone- 7-sug,GHIF)标准品,转入100 m L容量瓶中,加入60 mL甲醇,超声至标准品全部溶解,再加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:称取一定量碾碎的含有约5 mg毛蕊异黄酮葡萄糖苷的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声5 min,再加入50 mL乙醇,超声10 min(提取物)或40 min(原草),冷却后加入甲醇至刻度,摇匀后离心5 min,吸取清液即可注射。

(2)HPLC条件

色谱柱:Phenomenex LUNA C18(2),5μm,4.6×250 mm,100 A

流速:1.0 m L/min

注射量:10μL

UV检测波长:254 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:室温

梯度

若用UPLC可尝试如下经验条件:

色谱柱:Acquity UPLC®BEH C18,1.7μm,2.1×150 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:1.0μL

UV检测波长:254 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度:

以上条件是按经验估计得出的,仅供参考。

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)