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测试积雪草提取物中的三萜烯方法

【摘要】:积雪草为伞形科多年生草本,有止血功效,一定程度上有抗衰老和提高记忆效果。它的提取物主要含有4种三萜烯:积雪草酸、积雪草苷、羟基积雪草酸和羟基积雪草苷。UPLC条件色谱柱:Acquity HSS Ts C18,1.8μm,2.1×150 mm流速:0.4 mL/min注射量:1μLUV检测波长:210 nm移动相A:0.1%磷酸水溶液移动相B:乙腈柱温:45℃梯度:图4-33积雪草所含的4种三萜烯的色谱图结果计算积雪草苷、羟基积雪草酸、羟基积雪草苷的计算公式同上。

积雪草(guto kola)为伞形科多年生草本,有止血功效,一定程度上有抗衰老和提高记忆效果。它的提取物主要含有4种三萜烯:积雪草酸(asiatic acid)、积雪草苷(asiaticoside)、羟基积雪草酸(madecassic acid)和羟基积雪草苷(madecassoside)。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取10 mg各标准品,转入50 m L容量瓶中,加入30 mL甲醇,振荡直至标准品全部溶解,再加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制(原草样品):称取约2 g磨碎后的样品,转入100 mL圆底回流瓶中,加入20 mL乙醇/水(70∶30)混合液,回流15 min,冷却后把回流液转入一个50 mL容量瓶中。再回流一次,冷却后将回流液与第一次的回流液合并,再加乙醇/水(70∶30)混合液至刻度,摇匀后离心5 min,取上层清液即可注射。

样品液的配制(提取物样品):称取一定量的待测物含量与以上标准品的相近量的样品,转入50 m L容量瓶中,加入30 mL甲醇,振荡1 min,超声5 min,冷却后加入甲醇至刻度,摇匀,离心5 min,取上层清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity HSS Ts C18,1.8μm,2.1×150 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:1μL

UV检测波长:210 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:乙腈

柱温:45℃

梯度

图4-33 积雪草所含的4种三萜烯的色谱图

(3)结果计算

积雪草苷、羟基积雪草酸、羟基积雪草苷的计算公式同上。

A:相应标准品的峰面积

A:相应样品的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :相应的标准品的质量(mg)