首页 理论教育如何测试贯叶金丝桃的品质

如何测试贯叶金丝桃的品质

【摘要】:①标准液的配制:分别准确称取5 mg金丝桃素、贯叶金丝桃素和假贯叶金丝桃素标准品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L甲醇,振荡5 min,再加入甲醇至刻度,摇匀,移取1 mL至100 mL容量瓶中,加入甲醇稀释至刻度,摇匀后即可注射。

贯叶金丝桃是一种多年生草本植物,具有抗抑郁作用,它的主要成分是金丝桃素(hypericin)、贯叶金丝桃素(hyperforin)和假贯叶金丝桃素(pseudo hyperforin)。

以上3个分子都是非极性的,可以用C18或者苯基柱来分离及定量测试。

(1)测试步骤

金丝桃素、贯叶金丝桃素和假贯叶金丝桃素在天然的贯叶金丝桃里含量很低,为了避免采用大量的样品导致干扰物浓度升高而造成分离困难及影响色谱柱的使用寿命,本方法降低了标样的浓度,使每个待测化合物的浓度在1 ppm 左右,甚至更低。

①标准液的配制:分别准确称取5 mg金丝桃素、贯叶金丝桃素和假贯叶金丝桃素标准品,转入50 mL容量瓶中,加入30 m L甲醇,振荡5 min,再加入甲醇至刻度,摇匀,移取1 mL至100 mL容量瓶中,加入甲醇稀释至刻度,摇匀后即可注射。

②样品液的配制:准确称取一定量约含有0.1 mg金丝桃素的样品,转入100 m L容量瓶中,加入15 m L水,超声10 min,再加入50 mL乙醇,超声10 min(提取物)或40 min(原草),冷却后再加入甲醇至刻度,摇匀后再离心5 min,吸取上层清液即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Waters Symmetry C18,3.5μm,4.6×150 mm

流速:1.0 m L/min

注射量:10μL

UV检测波长:270 nm(贯叶金丝桃素、假贯叶金丝桃素),590 nm(金丝桃素)

移动相A:0.5%三氟乙酸

移动相B:甲醇

移动相C:乙腈

梯度

(3)结果计算

贯叶金丝桃素、假贯叶金丝桃素的计算公式同上。

A:相应标准品的峰面积

A:样品中相应待测物的峰面积

V:标准液的总体积(m L)

V:样品液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)

C:标准品的纯度(%)