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2023-07-02
黄芩的简易测试方法
【摘要】：黄芩含有多种黄酮及黄酮苷，其中含量最多的是黄芩苷和黄芩素。反相色谱柱可以有效分离这两种化合物，并可进行定量测试。②样品液的配制：称取一定量约含有2 mg黄芩苷的样品，转入100 m L容量瓶中，加入10 mL水，振荡5 min，超声2 min，加入60 m L乙醇，再超声10 min（提取物）或40 min（原草），冷却后加入甲醇至刻度，摇匀后离心10 min，移取上层清液即可注射。
黄芩含有多种黄酮及黄酮苷，其中含量最多的是黄芩苷和黄芩素。这两种化合物的标准品在市场上都可以买到。反相色谱柱可以有效分离这两种化合物，并可进行定量测试。
像其他黄酮苷和黄酮一样，在反相色谱中黄酮苷要比黄酮更快出峰，因为黄酮苷含有极性的糖分子。
（1）测试步骤
①标准液的配制：准确称取10 mg黄芩苷和2 mg黄芩素标准品，转入100 m L容量瓶中，加入60 m L甲醇，超声2 min，冷却后加入甲醇至刻度，摇匀，再用甲醇稀释5倍。
②样品液的配制：称取一定量约含有2 mg黄芩苷的样品，转入100 m L容量瓶中，加入10 mL水，振荡5 min，超声2 min，加入60 m L乙醇，再超声10 min（提取物）或40 min（原草），冷却后加入甲醇至刻度，摇匀后离心10 min，移取上层清液即可注射。
（2）UPLC条件
色谱柱：Acquity UPLC®BEH C18，1.7μm，2.1×150 mm
流速：0.4 m L／min
注射量：1μL
UV检测波长：275 nm
移动相A：0.1% 磷酸水溶液
移动相B：乙腈
柱温：45℃
梯度：
图4-21 黄芩样品的色谱图
（3）结果计算
A标：标准液中黄芩苷的峰面积
A样：样品液中黄芩苷的峰面积
V样：样品液的总体积（m L）
V标：标准液的总体积（m L）
W 样：样品的质量（mg）
W 标：黄芩苷标准品的质量（mg）
A标：标准液中黄芩素的峰面积
A样：样品液中黄芩素的峰面积
V样：样品液的总体积（m L）
V标：标准液的总体积（m L）
W 样：样品的质量（mg）
W 标：黄芩素标准品的质量（mg）
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