短碳链有机酸的实验方法详解

2023-07-02 理论教育版权反馈

【摘要】：蔓越莓、草莓、蓝莓、树莓等浆果以及其他一些水果都含有短碳链的有机酸。这里介绍蔓越莓所含的有机酸的测试方法，这些有机酸包括奎宁酸、莽草酸、苹果酸和柠檬酸。一般来说，移动相的p H 越低，有机酸的保留时间越长。②标准液的配制：准确称取10 mg奎宁酸、苹果酸和柠檬酸的标准品，转入100 mL容量瓶中，再移取1 m L莽草酸原始溶液至容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀后即可注射。

蔓越莓、草莓、蓝莓、树莓等浆果以及其他一些水果都含有短碳链的有机酸。这里介绍蔓越莓所含的有机酸的测试方法，这些有机酸包括奎宁酸、莽草酸、苹果酸和柠檬酸。

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第1章的“移动相的应用”中讨论过有机酸在酸性的移动相中降低了极性，从而在反相的色谱柱上增加了保留时间，有利于化合物的分离。一般来说，移动相的p H 越低，有机酸的保留时间越长。所以测试中遇到杂质干扰时，可以考虑用强酸来配制移动相，如用三氟乙酸、盐酸都可以，但一般p H 不宜小于1，以保护固定相不被水解。假如降低p H 还是不能解决问题，则可以考虑用离子对来延长保留时间，比如在移动相中加入强碱性的季铵盐等。

（1）测试步骤

①莽草酸原始溶液的配制：准确称取10 mg莽草酸标准品，转入25 m L容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀，标上“莽草酸原始溶液”，待用。

②标准液的配制：准确称取10 mg奎宁酸、苹果酸和柠檬酸的标准品，转入100 mL容量瓶中，再移取1 m L莽草酸原始溶液至容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀后即可注射。

③样品液的配制：称取一定量含有与标准液差不多量的有机酸的样品，转入100 m L容量瓶中，加入30 m L水，振荡5 min，超声15 min，冷却后再加水至刻度，摇匀后离心10 min，移取上层清液即可注射。

（2）UPLC条件

色谱柱：Acquity UPLC®HSS T3，1.8μm，2.1×150 mm

流速：0.4 m L／min

注射量：2μL

UV检测波长：210 nm

移动相：1.0% 磷酸水溶液

柱温：45℃

如果需要，移动相的p H 可用不同的酸（如TFA、盐酸）来调节。