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如何测试刺五加的有效性?

【摘要】:刺五加也称西伯利亚人参,具有潜在的免疫增强作用。其有效成分是刺五加苷A、B、C、D、E、F、G,其中以刺五加苷B和E为主要成分。刺五加苷B和E都是芳香化合物的糖苷,但是分子式和分子结构不一样,所以用反相柱就可以分离及定量测试。测试步骤①标准液的配制:准确称取5 mg刺五加苷B和刺五加苷E,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL甲醇,超声10 min,待标准品完全溶解后,加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。

刺五加也称西伯利亚人参,具有潜在的免疫增强作用。其有效成分是刺五加苷(eleutheroside)A、B、C、D、E、F、G,其中以刺五加苷B和E为主要成分。

刺五加苷B和E都是芳香化合物的糖苷,但是分子式和分子结构不一样,所以用反相柱就可以分离及定量测试。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg刺五加苷B和刺五加苷E,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL甲醇,超声10 min,待标准品完全溶解后,加入甲醇至刻度,摇匀后即可注射。或用甲醇进一步稀释后注射。

②样品液的配制:称取约含有5 mg刺五加苷B或刺五加苷E的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声10min,再加入50 mL甲醇,超声10min(提取物)或40 min(刺五加原草),摇匀,冷却后再加入甲醇至刻度,摇匀,离心后即可注射。

(2)UPLC条件

色谱柱:Acquity UPLC®HSS Ts C18,1.8μm,2.1×150 mm

柱温:45℃

流速:0.4 m L/min

注射量:2μL

UV检测波长:220 nm

移动相A:0.1% 磷酸水溶液

移动相B:0.1% 磷酸乙腈溶液

梯度

图4-19 刺五加苷B和刺五加苷E标准液的UPLC色谱图

(3)结果计算

A:相应标准品的峰面积

A:相应样品的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :相应标准品的质量(mg)

总的刺五加苷为刺五加苷B与刺五加苷E的含量之和。