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山楂的测试方法优化方案

【摘要】:测试步骤①标准液的配制:准确称取5 mg牡荆素、牡荆素鼠李糖苷和异牡荆素,转移至100 mL容量瓶中,加入60 mL甲醇,超声5 min,冷却后加入甲醇至刻度,摇匀即可注射。UPLC的条件色谱柱:Acquity UPLCBEH C18,1.7μm,2.1×100 mm流速:0.4 mL/min注射量:1μLUV检测波长:340 nm移动相A:0.1%磷酸水溶液移动相B:130 mL甲醇加70 m L乙醇柱温:45℃梯度:图4-15山楂标准品的色谱图结果计算牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素的计算公式同上。

山楂为蔷薇科植物,山楂或野山楂的果实有消食积、散瘀血、驱绦虫功用。本方法可以分离及定量测试山楂中的3个有效成分:牡荆素(vitexin)、异牡荆素(isovitexin)和牡荆素鼠李糖苷(vitexin- 2-O-rhamniside)。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg牡荆素、牡荆素鼠李糖苷和异牡荆素,转移至100 mL容量瓶中,加入60 mL甲醇,超声5 min,冷却后加入甲醇至刻度,摇匀即可注射。

②样品液的配制:称取约含有5 mg待测化合物的样品,转入100 mL容量瓶中,加入10 mL水,超声5 min,加入45 mL乙醇,再超声10 min(提取物)或40 min(山楂或山楂粉),冷却后加入甲醇至刻度,摇匀,离心(1 200 r/min)5 min,取上层清液即可注射。

(2)UPLC的条件

色谱柱:Acquity UPLC®BEH C18,1.7μm,2.1×100 mm

流速:0.4 mL/min

注射量:1μL

UV检测波长:340 nm

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:130 mL甲醇加70 m L乙醇

柱温:45℃

梯度

图4-15 山楂标准品的色谱图

(3)结果计算

牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素的计算公式同上。

A:相应标准品的峰面积

A:相应样品的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :相应标准品的质量(mg)