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淫羊藿苷检测方法

【摘要】:淫羊藿为多年生草本,其有效成分有淫羊藿苷和淫羊藿定等10多种,其中淫羊藿苷和淫羊藿定C含量最多。从以上分子结构可以看出淫羊藿的有效成分都是黄酮苷,可以用反相色谱加以分离并定量测试。②样品液的配制:称取一定量含有相当于10 mg淫羊藿苷的样品,转入50 m L容量瓶中,加入5 mL水,超声5 min后再加入30 mL乙醇,提取物超声10 min,淫羊藿原草超声40 min。

淫羊藿(epimedium)为多年生草本,其有效成分有淫羊藿苷(icariins)和淫羊藿定等10多种,其中淫羊藿苷和淫羊藿定C含量最多。有补肾壮阳,祛风除湿功用。

从以上分子结构可以看出淫羊藿的有效成分都是黄酮苷,可以用反相色谱加以分离并定量测试。

(1)测试步骤

①标准液的配制:准确称取5 mg淫羊藿苷标准品,转移至25 mL容量瓶中,加入甲醇溶解后再加入甲醇至刻度,摇匀。若需要可以用甲醇进一步稀释。

②样品液的配制:称取一定量含有相当于10 mg淫羊藿苷的样品,转入50 m L容量瓶中,加入5 mL水,超声5 min后再加入30 mL乙醇,提取物超声10 min,淫羊藿原草超声40 min。冷却后加入乙醇至刻度,摇匀,离心,移取上层清液即可注射。如需要可用甲醇进一步稀释。

(2)HPLC条件

色谱柱:Phenyl type column,250×4.6 mm,4μm,Phenomenex Synergic

流速:1.0 m L/min

注射量:10μL

UV检测波长:272 nm

移动相A:0.1% 磷酸水溶液

移动相B:乙腈

梯度

出峰时间见图4- 12。

图4-12 淫羊藿苷标准品的色谱图

图4-13 天然淫羊藿的色谱图,按出峰顺序依次为:淫羊藿次苷C、淫羊藿新苷A、淫羊藿定B、淫羊藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷F、宝藿苷II、箭藿苷B、宝藿苷I

(3)结果计算

A:标准品的峰面积

A:样品的峰面积

V:样品液的总体积(m L)

V:标准液的总体积(m L)

W :样品的质量(mg)

W :标准品的质量(mg)

其他淫羊藿苷和淫羊藿定也可用淫羊藿苷作标样来计算含量。