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2025-09-29
辣椒碱的测试方法大揭秘，
【摘要】：在实际测试中，可用单一的辣椒素作标样来定性和定量其他各个辣椒碱。把所有的结果相加即为辣椒总碱的含量。测试步骤①标准液的配制：称取10 mg辣椒素，转入100 m L容量瓶中，加甲醇溶解，定容，摇匀。若样品是辣椒或辣椒粉，称取相当于含有10 mg辣椒素的样品，转入200 mL容量瓶中，加入90 m L醋酸钠饱和了的95%乙醇溶液，放入60℃水浴中，用磁棒搅拌5 h。
辣椒总碱包括辣椒素（capsaicin）、降二氢辣椒碱（nordihydrocapsaicin）、二氢辣椒碱（dihydrocapsaicic）、高辣椒碱（homocapsaicin）和高二氢辣椒碱（homodihydrocasaicin）。
用反相色谱C18柱可以分离及定量测试这5个化合物。按照非极性强弱来判断出峰时间，应该是直链碳链最短的降二氢辣椒碱先出峰，然后是辣椒素、二氢辣椒碱、高辣椒碱和高二氢辣椒碱。知道出峰的次序，再根据峰的紫外光谱，就可以判断是哪个辣椒碱了。从上面的分子结构可以看出，所有辣椒碱的分子结构都很相似，所以它们的紫外光谱及紫外吸收的灵敏度也很相似。在实际测试中，可用单一的辣椒素作标样来定性和定量其他各个辣椒碱。最后将计算得到的每个辣椒碱的含量用相对分子质量的比例来校正，就可得到准确的结果。把所有的结果相加即为辣椒总碱的含量。
（1）测试步骤
①标准液的配制：称取10 mg辣椒素，转入100 m L容量瓶中，加甲醇溶解，定容，摇匀。如需要，可进一步用甲醇稀释。
②样品液的配制：若样品是提取物或含有提取物的产品，称取相当于含有10 mg辣椒素的样品，转入100 m L容量瓶中，加入10 mL水，超声10 min，加入50 mL乙醇，再超声5 min，冷却后加入甲醇至刻度，摇匀后取10～20 mL至离心管中，离心5 min，取清液即可注射。如必要可用甲醇稀释后再注射。
若样品是辣椒或辣椒粉，称取相当于含有10 mg辣椒素的样品，转入200 mL容量瓶中，加入90 m L醋酸钠饱和了的95%乙醇溶液，放入60℃水浴中，用磁棒搅拌5 h。冷却后加入10 m L甲醇，摇匀，离心。取上层清液可直接注射，如需要也可稀释后再注射。
（2）HPLC条件
色谱柱：Phenomenex Luna C18（2），5μm 4.6×250 mm，100 A
流速：1.0 m L／min
注射量：10μL
UV波长：282 nm
移动相A：水
移动相B：乙腈(https://www.chuimin.cn)
移动相C：甲醇
梯度：（25 min结束）
（3）结果计算
A标：辣椒素标准品的峰面积
A样：样品液中相应的辣椒碱的峰面积
V样：样品液的总体积（m L）
V标：标准液的总体积（m L）
W 样：样品的质量（mg）
W 标：辣椒素标准品的质量（mg）
Rw／w：被测物的相对分子质量／辣椒素的相对分子质量
总辣椒碱的含量为所有测到的辣椒碱的总和。
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2025-09-29
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