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姜氏测试方法的分析介绍,

【摘要】:姜或姜的提取物一般测试6~10种标志性化合物就足够了,主要有姜辣素、姜烯酚、姜辣二醇和姜辣二酮。HPLC条件色谱柱:Phenomenex LUNA C18,5μm,4.6×250 mm,100 A移动相A:0.1%磷酸水溶液移动相B:0.1%磷酸乙腈溶液流速:1.0 mL/min柱温:室温UV 检测波长:282 nm注射量:20μL梯度:出峰次序:6-姜辣素、辣椒素、8-姜辣素、6-姜烯酚、6-姜辣二醇、6-姜辣二酮、10-姜辣素、8-姜烯酚、10-姜烯酚。

姜(ginger)或姜的提取物一般测试6~10种标志性化合物就足够了,主要有姜辣素(gingerol)、姜烯酚(shogaol)、姜辣二醇和姜辣二酮。

从上面的分子结构可以看出这一组化合物都含有一个苯酚基团,所以UV的灵敏度比较高,用PDA检测器可以满足一般测试的需要。对含量极少的样品可以考虑用MS/MS检测器。固定相可用C18柱或苯基柱。以上标准品市场上都有出售,所以最准确的方法应该是用相应的标准品来定量各个待测化合物。但是在实际测试中有些方法仅用辣椒素一个标准品来定量所有的待测化合物。显然这两种方法测得的结果会有一定的差异。

(1)测试步骤

标准溶液的配制:首先配制各个成分的原始标准液,准确称取5 mg标准品,转移至各个不同的25 mL容量瓶中,加入15 mL 80%甲醇水溶液,超声1~5 min直至完全溶解,再加甲醇水溶液至刻度,标上标准品的化学名称。然后转移3 m L辣椒素,1 m L 6-姜辣素、8-姜辣素和10-姜辣素的原始标准液至一个50 mL容量瓶中,再加入1 mL 6-姜烯酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚的原始液,1 mL 6-姜辣二醇和6-姜辣二酮的原始液,然后加入80%甲醇水溶液至刻度,摇匀即可注射。

②样品液的配制(生姜干粉):准确称取1 g生姜干粉,转入100 mL容量瓶中,加入60 mL 80%甲醇水溶液,振荡1 min,在50℃水浴中超声30 min,每5 min摇动10 s。冷却后加入80%甲醇水溶液至刻度,摇匀,离心10 min,取上层清液即可注射。

样品液的配制(生姜提取物):准确称取200 mg提取物或含有等量成分的产品,转移至100 mL容量瓶中,加入10 mL水,振荡5 min,超声5 min,加入60 mL甲醇,振荡1 min,放入50℃水浴中超声5 min,冷却后加80%甲醇水溶液至刻度,摇匀,离心(1 200 r/min)10 min,取上层清液即可注射。

(2)HPLC条件

色谱柱:Phenomenex LUNA C18(2),5μm,4.6×250 mm,100 A

移动相A:0.1%磷酸水溶液

移动相B:0.1%磷酸乙腈溶液

流速:1.0 mL/min

柱温:室温

UV 检测波长:282 nm

注射量:20μL

梯度

出峰次序:6-姜辣素、辣椒素、8-姜辣素、6-姜烯酚、6-姜辣二醇、6-姜辣二酮、10-姜辣素、8-姜烯酚、10-姜烯酚。

(3)结果计算

A:标准液中相应标准品的峰面积

A:样品液中相应待测物的峰面积

V:样品液的总体积(mL)

C:标准液中相应标准品的浓度(mg/mL)

W :样品的质量(mg)

总含量为每个成分含量的总和。