黄曲霉毒素的LC-MS/MS检测方法

2023-07-02 理论教育版权反馈

【摘要】：美国FDA把黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2的总量的检测极限设在20 ppb，这是很有挑战性的。这么低的测试极限用LC-MS／MS方法可以实现。所以这4个分子用C18反相柱是可以分开的，尽管MS／MS对分离的要求不是很高。标准溶液的浓度见表3：表3黄曲霉毒素标准溶液浓度②样品溶液的配制：称取2 g样品，转移入50 m L容量瓶中，加入20 m L甲醇，振荡2 min，超声20 min。结果计算参照第1章“LC-MS／MS的定性和定量测试”。

黄曲霉毒素（aflatoxins）是强烈致癌物质，主要存在于腐败的谷物及豆科作物中。美国FDA把黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2的总量的检测极限设在20 ppb，这是很有挑战性的。这么低的测试极限用LC-MS／MS方法可以实现。

从以上分子结构可以看到黄曲霉毒素B1比黄曲霉毒素B2多了1个双键，黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2也一样；黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素G2与对应的黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素B2相比各多了1个氧原子。所以这4个分子用C18反相柱是可以分开的，尽管MS／MS对分离的要求不是很高。

（1）测试步骤

①标准溶液的配制：准确称取500 mg黄曲霉毒素标准品（Sigma-P9441）至100 m L容量瓶中，加入约60 m L甲醇，摇匀后再加甲醇定容，标上“黄曲霉毒素标准原始液”。

移取50μL标准原始液至50 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，标上“高浓度标准溶液”（用来确认黄曲霉毒素的色谱峰，检测仪器的适应性）。

用甲醇将高浓度标准溶液稀释10倍，得到低浓度标准溶液，标上“低浓度标准溶液”（用来作定量测试）。

标准溶液的浓度见表3：

表3　黄曲霉毒素标准溶液浓度

②样品溶液的配制：称取2 g样品，转移入50 m L容量瓶中，加入20 m L甲醇，振荡2 min，超声20 min。摇匀后离心10 min，抽取上层清液至2 mL注射瓶中，可直接注射。

（2）UPLC条件

色谱柱：Acquity UPLC®HSS C18，1.8μm，2.1×150 mm

流速：0.40 mL／min