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如何测定循环冷却水中的异养菌数?

【摘要】:异养菌分为本身能从水质中摄取无机物或有机物而生活的腐生菌和依赖寄主供给营养的寄生菌两类。通常所说的异养菌指的是存在于水中的腐生菌。在循环冷却水中,异养菌不仅生长繁殖快,而且为数多,基本上代表了水中全部好氧菌的数量,所以一般在测定时,以这类细菌的数量作为细菌总数。循环冷却水中异养菌数的监测频率应为1次/周。对菌落计数用平皿计数法对异养菌的菌落进行计数,然后再计算每毫升水样中的异养菌数。

异养菌分为本身能从水质中摄取无机物或有机物而生活的腐生菌和依赖寄主供给营养的寄生菌两类。通常所说的异养菌指的是存在于水中的腐生菌。无论在工业循环冷却水中,还是宾馆的中央空调水系统或油田注水中,都存在着大量的异养菌。

在循环冷却水中,异养菌不仅生长繁殖快,而且为数多,基本上代表了水中全部好氧菌的数量,所以一般在测定时,以这类细菌的数量作为细菌总数。异养菌群在循环冷却水和油田注水系统中常聚集在金属表面粗糙处或凹坑和构件隙缝处,能产生致密的黏液,故也称为产黏泥细菌,粘附水中的悬浮物和其他丝状菌、霉菌、藻类、原生动物等,在管壁形成黏泥。

异养菌是循环冷却水处理、油田水处理以及宾馆水处理中微生物现场监测的主要对象之一。循环冷却水中异养菌数的监测频率应为1次/周。敞开式循环冷却水中的异养菌数宜小于1×105/mL。

1.培养基的制备

异养菌的培养基可采用如下的配方来配制:蛋白胨10g;琼脂15~20g;牛肉膏3g;加蒸馏水至1000mL;氯化钠5g;pH7.2~7.4。

按上述用称量好各试剂。先将琼脂加适量蒸馏水加热溶解,待琼脂溶透后再将其余试剂加入混匀,加蒸馏水至1000mL,再混匀。然后趁热用几层纱布内夹脱脂棉花过滤。用1mol/LHCl和1mol/LNaOH溶液调节pH至7.5左右。趁热分装于三角瓶内,塞上棉塞用牛皮纸包扎,用高压蒸汽于121℃灭菌30min。灭菌后pH为7.2~7.4。

2.测定方法

通常用平皿计数法测定冷却水中的异养菌数。具体操作如下:

(1)稀释 每个水样做3~5个稀释度。

(2)接种 用已灭菌的移液管吸取水样稀释液1mL,注入无菌培养皿中,每个稀释度做3~5个平行皿。

(3)制平板 再将融化并冷至45~50℃的无菌培养基倒入无菌培养皿中,每皿中倒入12~15mL,迅速摇匀,静止凝固。

(4)恒温培养倒置平皿于28~30℃的恒温培养箱中培养72h。

(5)对菌落计数用平皿计数法对异养菌的菌落进行计数,然后再计算每毫升水样中的异养菌数。

3.计算

1mL水样中的异养菌数为某一稀释倍数的3~5个培养皿的平均菌落数乘以该稀释倍数(即稀释度的倒数)。