如何进行耐用性试验及其控制措施

2023-06-29 理论教育版权反馈

【摘要】：耐用性试验是考察环境或其他条件变量对分析方法影响的一项检验程序。进行耐用性试验的目的在于鉴别这些必须仔细控制的实验条件，并针对检测结果准确度有较大影响的因素，提出有效控制措施，并在试验方法文本中予以明确的书面说明，要求检测人员在检测中严格执行。HPLC流动相的pH水溶性缓冲液pH可在标准规定的±0.2pH单位范围内调整。但可使用仪器制造商规定的程序或其他验证程序验证检测器的波长，其误差最大±3nm。

一个好的分析方法应该不受环境等一些因素的变化而变化。耐用性试验是考察环境或其他条件变量对分析方法影响的一项检验程序。进行耐用性试验的目的在于鉴别这些必须仔细控制的实验条件，并针对检测结果准确度有较大影响的因素，提出有效控制措施，并在试验方法文本中予以明确的书面说明，要求检测人员在检测中严格执行。例如，实验室温度或试验中使用的某一加热装置的温度，这些条件在某些情况下具有不可忽略的影响，而在另一些情况下则影响很小，进行耐用性试验可引入温度自由变量以建立温度控制允许范围。

通常需要考虑影响检测过程与结果的微小条件（因素）包括但不仅限于以下内容。

①人员：不同检测人员。

②仪器：不同品牌、不同型号的检测仪器。

③材料：不同品牌试剂、实验耗材。

④方法：合理范围内的方法调整。

⑤环境：实验室环境温度、湿度、气压等条件的变化。

需要说明是，在方法相关因素的耐用性考察中，因素的调整须在合理的范围内，当分析方法条件调整超出这一合理的范围时，则视为实验室检测程序发声实质性或重大的改变，即方法变动（method changes）。以色谱分析方法调整为例，色谱分析领域方法调整准则如下^［2，34］。

（1）HPLC流动相的pH水溶性缓冲液pH可在标准规定的±0.2pH单位范围内调整。该要求既适用于等度洗脱条件，也适用于梯度洗脱条件。

（2）HPLC缓冲液中盐的浓度流动相制备过程中，如果pH变化满足要求，则水溶性缓冲盐中盐浓度可在± 10%范围内调整。该要求既适用于等度洗脱条件，也适用于梯度洗脱条件。

（3）HPLC流动相中各组分的比例对于占比小于等于50%的流动相组分，流动相中组分的调整需要同时满足以下三个要求：一是流动相中组分的增减范围为以下两种方式计算结果的较大值，一种方式是该组分所占总流动相比例的± 30%，另一种方式是该组分绝对量的± 2%；二是任何流动相组分调整的绝对量不能超过± 10%；三是调整后，任何组分的最终含量都不能为零。

（4）HPLC紫外－可见光检测器的波长HPLC紫外－可见光检测器的波长不允许偏离方法中的指定值。但可使用仪器制造商规定的程序或其他验证程序验证检测器的波长，其误差最大±3nm。

（5）色谱柱柱长（GC、HPLC）GC或HPLC所使用色谱柱柱长最大可调整值为± 70%。

（6）色谱柱内径（GC、HPLC）HPLC柱内径最大可调整值为± 25%，气相色谱柱内径最大可调整值为± 50%。

（7）流速（GC、HPLC）GC或HPLC最大可能调整值为±50%。但对于液相色谱而言，该要求仅适用于等度洗脱条件。

（8）进样量（GC、HPLC）GC或HPLC进样量可减少至精密度、线性和检出限可接受限制。该要求既适用于等度洗脱条件，也适用于梯度洗脱条件。

（9）HPLC粒径对于等度洗脱，调整后的色谱柱长度与粒径之比应与调整前保持一致，或者最大调整值在－25%～50%。

（10）HPLC柱温最大可调整值为± 10°。该要求既适用于等度洗脱条件，也适用于梯度洗脱条件。

（11）GC柱箱温度最大可调整值为±10%。

（12）GC毛细管柱膜厚最大可调整范围为－50%～100%。

（13）GC程升温允许可调整温度为±10%。对于需保持特定温度或从一个温度改变至另一温度时，允许调整的最大限度为± 20%。