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花青素的检测方法及优劣分析

【摘要】:颜色反应水溶液中分别加入浓盐酸、1%香荚兰的盐酸溶液和KI-I2试剂,进行颜色反应。浓盐酸中显粉红色,1%香荚兰的盐酸溶液中显红色,在KI-I2试剂的作用下不产生棕色沉淀。紫外-可见分光光度法溶液中加浓盐酸少许,在紫外-可见分光光度计中扫描鉴定,在270~280 nm波长处都有吸收峰,而在465~550 nm波长处有花青素特征吸收峰。根据相应专业基础课的知识储备,结合所查资料,讨论各种分析检测方法的优劣。

(1)颜色反应 水溶液中分别加入浓盐酸、1%香荚兰的盐酸溶液和KI-I2试剂,进行颜色反应。浓盐酸中显粉红色,1%香荚兰的盐酸溶液中显红色,在KI-I2试剂的作用下不产生棕色沉淀。

(2)薄层鉴别 点样于硅胶GF254薄板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯(1∶40)为展开剂进行薄层层析。观察所得斑点在可见光和紫外光下的颜色,并分别用氨蒸气、碘蒸气熏蒸,以及50%硫酸喷雾,使斑点显色。可见光下显蓝紫色,紫外光下显浅蓝色;氨蒸气熏蒸后,可见光下显蓝紫色,紫外光下显浅蓝色;碘蒸气熏蒸后,可见光下显粉红色。

(3)紫外-可见分光光度法 溶液中加浓盐酸少许,在紫外-可见分光光度计中扫描鉴定,在270~280 nm波长处都有吸收峰,而在465~550 nm波长处有花青素特征吸收峰。

(4)高效液相色谱法 色谱仪:美国Waters 510型高压液相色谱仪,Waters 2487检测器,520 nm波长检测。分析柱:BDS Hypersil C18。流动相:20%A相(乙腈),80%B相(2%甲酸水溶液),等度洗脱。流速:0.8 mL/min。进样量:10 μL。柱温:28℃。

根据相应专业基础课的知识储备,结合所查资料,讨论各种分析检测方法的优劣。