菌种选育、保藏与种子制备技巧

2023-06-24 理论教育版权反馈

【摘要】：（二）菌种保藏的原理菌种保藏主要是根据菌种的生理、生化特性，人工创造条件使孢子或菌体的生理代谢活动尽量降低，以减少其变异。将链霉菌菌种接于斜面培养基，35℃培养4～5 d，孢子成熟后，配制成浓度为107个/mL的孢子悬液。取1 mL孢子悬液接种于种子培养基，31℃振荡培养16～18 h。按8%接种量将种子培养液接入发酵培养基中，于31℃振荡培养6 d。

（一）菌种选育原理

利用物理、化学等诱变因素，诱发基因突变，然后根据育种的要求、目的，从无定向的突变株中筛选出具有优良性状的突变体，因此诱变育种不仅仅是诱变处理，而且还在于从处理过的群体中，筛选出所需要的突变体。

进行诱变育种时，首先是制定筛选方法。筛选方法一般分为初筛与复筛两个阶段，前者以量为主，后者以质为主。筛选步骤如下。

（1）初筛：原始菌种→菌种纯化→出发菌株→制单细胞悬液→活菌计数→用诱变剂处理→挑取变异菌株→初筛优良菌株。

（2）复筛：初筛的菌株→摇瓶发酵→观察测定→平皿培养→挑取优良菌株（复筛）→测定生产性能→投产试验。

1.确定需要哪些仪器设备及药品。

2.制定出选育优良的产四环素菌种方案并实施。

（二）菌种保藏的原理

菌种保藏主要是根据菌种的生理、生化特性，人工创造条件使孢子或菌体的生理代谢活动尽量降低，以减少其变异。保藏时，一般利用菌种的休眠体（孢子、芽孢等），创造最有利于休眠的环境条件，如低温、干燥、隔绝空气或氧气、缺乏营养物质等，以降低菌种的代谢活动，减少菌种变异，使菌种处于休眠状态，抑制其繁殖能力，达到长期保存的目的。一个好的菌种保藏方法，应能保持原菌种的优良特性和较高的存活率，同时也应经济、简便。

保藏方法有斜面低温保藏法、矿物油中浸没保藏法、固体曲保藏法、砂土管保藏法、普通冷冻保藏法、超低温冷冻保藏法、冷冻干燥法、液氮冷冻保藏法、寄主保藏法等。

将链霉菌菌种接于斜面培养基，35℃培养4～5 d，孢子成熟后，配制成浓度为107个/mL的孢子悬液。取1 mL孢子悬液接种于种子培养基，31℃振荡（180 r/min）培养16～18 h。按8%接种量将种子培养液接入发酵培养基中，于31℃振荡（260 r/min）培养6 d。取样，测定四环素效价。

1.确定需要哪些仪器设备及药品。

2.采用合适的方法保藏菌种。

菌种选育、保藏与种子制备技巧

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