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葛根素的提取方法与应用探究

【摘要】:大豆素、大豆苷及葛根素均能缓解高血压患者的头痛症状。图1-12-3葛根素提取工艺流程二、生产工艺过程(一)葛根素提取工艺称取葛根20.0 g,用粉碎机粉碎,得到葛根粗粉。取1.0 mL乙醇同样稀释作空白对照,在250 nm波长处测定吸光度,由回归方程计算出产品中葛根素的纯度。

一、生产前准备

(一)查找资料,了解葛根素的基本知识

葛根为豆科植物野葛(Pueraria thunbergiana Benth)的根,含异黄酮类化合物,主要成分有大豆素、大豆苷、大豆素-7,4'-二葡萄糖苷及葛根素、葛根素-7-木糖苷。葛根总异黄酮有增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆素、大豆苷及葛根素均能缓解高血压患者的头痛症状。葛根总异黄酮中各种异黄酮不具有5-羟基,故可以用氧化铝色谱法分离,以水饱和正丁醇洗脱,可以依次洗下大豆素、大豆苷、葛根素、葛根素-7-木糖苷。

(二)确定生产技术、生产原料和工艺路线

(1)确定生产技术:生物化学制药技术、生物制药下游技术。

(2)确定生产原料:葛根。

(3)确定葛根素提取工艺流程,如图1-12-3所示。

图1-12-3 葛根素提取工艺流程

二、生产工艺过程

(一)葛根素提取工艺

(1)称取葛根20.0 g,用粉碎机粉碎,得到葛根粗粉。

(2)将葛根粗粉置于三口圆底烧瓶中,加入95%乙醇20.0 mL,在水浴锅中(58~60℃)热浸29 h。

(3)过滤,滤液蒸发浓缩为葛根素浸膏。

(4)将浸膏用4.0 mL水饱和正丁醇和4.0 mL正丁醇交替溶解,即在旋转蒸发仪上旋转振荡1 h,静置2 h。

(5)吸取上清液。上清液用水进行萃取,萃取液浓缩至原体积的一半。

(6)以D101大孔树脂作为富集剂,用粗提浸膏7倍量的大孔树脂吸附。

(7)用12倍量的70%(体积分数)乙醇水溶液作为洗脱剂洗脱,再经减压浓缩,浓缩液静置析出葛根素。

(8)抽滤并经自然干燥,得粗制品。

(9)取粗制品0.75 g,加入95%的冰乙酸2.62 mL,加热至116℃溶解,冷却结晶,得成品。

(二)葛根素含量测定方法

(1)标准曲线的绘制 称取干燥至恒重的葛根素5 mg,加95%乙醇溶解,于25 mL容量瓶中稀释至刻度,吸取0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL溶液,置于10 mL容量瓶中,以95%乙醇精确加至10 mL,摇匀。同时以95%乙醇作空白对照,在250 nm波长处测定吸光度,得回归方程

(2)样品含量的测定 采用紫外分光光度计,精密称取葛根素25 mg,加95%乙醇溶解,于50 mL容量瓶中稀释至刻度,摇匀。吸取1.0mL于25 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。取1.0 mL乙醇同样稀释作空白对照,在250 nm波长处测定吸光度,由回归方程计算出产品中葛根素的纯度。