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核酸的组成、分类及性质概述

【摘要】:(二)核酸及核酸类药物的分类1.核酸的分类根据化学组成不同,可将核酸分为核糖核酸和脱氧核糖核酸两大类。在酸性溶液中,DNA、RNA和核苷酸分子上的嘌呤易水解,分别成为具有游离糖醛基的无嘌呤核酸和磷酸酯。

(一)核酸的组成

核酸(nucleic acid)由许多核苷酸(nucleotide)以3',5'-磷酸二酯键连接而成,核苷酸又由磷酸、核糖和碱基三部分组成。将核苷酸中的磷酸基团去掉,剩余部分称为核苷(nucleoside)。核苷进一步水解可生成戊糖和碱基(base)。

(二)核酸及核酸类药物的分类

1.核酸的分类

根据化学组成不同,可将核酸分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA)两大类。

2.核酸类药物的分类

依据核酸药物及其衍生物的化学结构和组成可将其分为四大类。

(1)核酸碱基及其衍生物 多数是经过人工化学修饰的碱基衍生物,主要有别嘌呤醇(allopurinol)、赤酮嘌呤(eritadenine)、硫代鸟嘌呤(thioguanine)、氮杂鸟嘌呤(azaguanine)、硫唑嘌呤(azathioprine)、巯嘌呤(mercaptopurine)、磺硫嘌呤(tisupurine)、氯嘌呤(chloropurine)、乳清酸、氟胞嘧啶(flucytosine)等。

(2)核苷及其衍生物 依据形成核苷的碱基或核糖的不同,又可分为:腺苷类,如腺苷;胞苷类,如阿糖胞苷(Ara-C);肌苷类,如肌苷;脱氧核苷类,如氮杂脱氧胞苷(5-aza-2'-

deoxycytidine)。

(3)核苷酸及其衍生物 根据所含的核苷酸数目又可分为:单核苷酸类,如腺苷酸(AMP)、尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)、胞三磷(CTP)等;二核苷酸类,如辅酶Ⅰ(CoⅠ);多核苷酸类,如聚肌胞苷酸(PolyI:C)。

(4)核酸 包括RNA和DNA。

(三)核酸的性质

1.理化性质

RNA和核苷酸的纯品都为白色粉末或晶体,DNA则为白色石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外,核酸和核苷酸大都具酸味。

DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般溶于水,不溶于乙醇氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达4%。相对分子质量在108以上的DNA在水中浓度达1%以上时,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中,DNA、RNA和核苷酸分子上的嘌呤易水解,分别成为具有游离糖醛基的无嘌呤核酸和磷酸酯。在中性或弱碱性溶液中较稳定。

DNA、RNA和核苷酸既有磷酸基又有碱性基,故为两性电解质,但总体上酸性较强,能与Na+、K+、Mg2+等金属离子结合成盐,也易与碱性化合物结合成复合物,如能与甲苯胺蓝、派罗红、甲基绿等碱性染料结合,其中甲基胺蓝能使RNA和DNA均染上蓝色,派罗红专染RNA呈红色,甲基绿专染DNA呈绿色。

核酸具有旋光性,旋光方向为右旋,由于核酸分子具有高度不对称性,故旋光性很强,这是核酸的一个重要特性。当核酸变性时,比旋光度值大大降低。

2.核酸的颜色反应

DNA和RNA经酸水解后,易脱下嘌呤形成无嘌呤的醛基化合物,或水解得到核糖和脱氧核糖,这些物质与某些酚类、苯胺类化合物结合形成有色物质,可用来进行定性分析或根据颜色的深浅进行定量测定。

孚尔根氏染色法是一种对DNA的专一染色法,其基本原理是DNA的部分水解产物能使已被亚硫酸钠退色的无色品红碱(希夫试剂)重新恢复颜色。用显微分光光度法可定量测定颜色强度。

核酸中糖的颜色反应是利用苔黑酚(3,5-二羟甲苯)法:将含有核糖的RNA与浓盐酸及3,5-二羟甲苯一起在沸水浴中加热20~40 min,即有绿色物质产生。这是由于RNA脱嘌呤后的核糖与酸作用生成糠醛,再与3,5-二羟甲苯作用而显蓝绿色。

脱氧核糖用二苯胺法测定:DNA在酸性条件下与二苯胺一起水浴加热5 min,产生蓝色,这是脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ-酮基戊醛,再与二苯胺作用而显蓝色。

3.核苷酸的解离性质

核苷酸由磷酸、碱基和核糖组成,为两性电解质,在一定pH条件下可解离而带有电荷,各种核苷酸分子上可解离的基团有氨基、烯醇基和第1、第2磷酸基。这是电泳和离子交换法分离各种核苷酸的重要依据。在pH为3.5的条件下进行电泳可将这四种核苷酸分开,移动速度UMP>GMP>AMP>CMP。将斑点用稀盐酸洗脱下来,用紫外分光光度法测定,利用核苷酸的摩尔吸光系数可计算出含量。该法简便迅速,灵敏度高,干扰因素较少。

4.核苷酸的紫外吸收性质

由于核酸、核苷酸类物质都含有嘌呤、嘧啶碱,都具有共轭双键,故对紫外光有强烈的吸收。在一定pH条件下,各种核苷酸都有特定紫外吸收的吸光度比值。当定性测定某一未知碱基或核苷酸样品时,可在250 nm、260 nm、280 nm、290 nm波长处先测得吸光度值,再计算出相应比值(A250/A260、A280/A260、A290/A260),与已知核苷酸的标准比值比较,判断属于哪一种碱基或核苷酸。