脂类药物的生产技术优化

2023-06-24 理论教育版权反馈

【摘要】：（一）直接提取法在生物体或生物转化反应体系中，有些脂类药物是以游离形式存在的，如卵磷脂、脑磷脂、花生四烯酸及前列腺素等。提取不稳定的脂类时，应尽量避免加热。（三）生物转化法生物转化法包括微生物发酵、动植物细胞培养和酶工程技术。例如：微生物发酵法或烟草细胞培养法生产辅酶Q10；紫草细胞培养用于生产紫草素；以花生四烯酸为原料，用类脂氧化酶-2为前列腺素合成酶的酶原，通过酶工程技术将原料转化合成前列腺素。

（一）直接提取法

在生物体或生物转化反应体系中，有些脂类药物是以游离形式存在的，如卵磷脂、脑磷脂、花生四烯酸及前列腺素等。因此，通常根据各种成分的溶解性质，采用相应溶剂系统从生物组织或反应体系中直接抽提出粗品，再经过分离纯化并进一步精制，得到纯品。

（1）提取法往往采用几种溶剂组合的方式进行，以醇作为组合溶剂的必需组分。醇能裂开脂质-蛋白质复合物，溶解脂类和使生物组织中脂类降解酶失活。醇溶剂的缺点是糖、氨基酸、盐类等也被提取出来，要除去水溶性杂质，最常用的方法是水洗提取物，但可能形成难处理的乳浊液。采用V氯仿：V甲醇∶V水=1∶2∶0.8组合溶剂提取脂质，提取物再用氯仿和水稀释，形成两相体系，V氯仿+甲醇∶V水=1∶0.9，水溶性杂质分配进入甲醇-水相，脂类进入脂肪相，基本能克服上述问题。

（2）提取一般在室温下进行，阻止其发生过氧化与水解反应，如有必要，可低于室温。提取不稳定的脂类时，应尽量避免加热。

（3）使用含醇的混合溶剂，能使许多酯酶和磷脂酶失活，对较稳定的酶，可将提取材料在热乙醇或沸水中浸1～2 min，使酶失活。

（4）提取溶剂要刚蒸馏的，不含过氧化物。

（5）提取高度不饱和的脂类时，溶剂中要通入氮气以驱除空气，操作应置于氮气环境下进行。

（6）不要使脂类提取物完全干燥或在干燥状态下长时间放置，应尽快溶于适当的溶剂中。

（7）脂类具有过氧化与水解等不稳定性质，提取物不宜长期保存。如要保存可溶于新鲜蒸馏的V氯仿：V甲醇=2∶1的溶剂中，于-15～0℃保存，时间较长者（1～2年），必须加入抗氧化剂，保存于-40℃。

（二）水解法

对有些和其他成分构成复合物质的脂类药物，需经水解或适当处理后，再进行提取分离纯化，或先提取再水解。

（1）脑干中胆固醇酯经丙酮提取，浓缩后残留物用乙醇结晶，再用硫酸水解和结晶才能获得胆固醇。

（2）辅酶Q10与动物细胞内线粒体膜蛋白结合成复合物，故从猪心提取辅酶Q10时，需将猪心绞碎后用氢氧化钠水解，然后用石油醚提取，经分离纯化制得。

（3）在胆汁中，胆红素大多与葡萄糖醛酸结合成共价化合物，故提取胆红素需先用碱水解胆汁，然后用有机溶剂抽提。

（4）胆汁中胆酸大都与牛磺酸或甘氨酸形成结合型胆汁酸，要获得游离胆酸，需将胆汁用10%氢氧化钠溶液加热、水解后，再进一步分离纯化才可得到产物。